模块二中药中各类化学成分的分离技术.ppt

第69页,共74页，星期六，2024年，5月应用：此法常用于分离纯化皂苷、蛋白质、多肽、多糖等大分子成分，以除去无机盐、单糖、双糖等小分子杂质。常用的透析膜（需根据分离成分的分子量大小来选择）（1）动物膀胱膜（2）火棉胶膜（3）羊皮纸膜（4）再生纤维素膜（5）玻璃纸膜（6）蛋白胶膜第70页,共74页，星期六，2024年，5月操作步骤：(1)将浓缩的中药水提液或乙醇提取液缓缓加入透析膜袋内，防止膜破裂，悬于盛有蒸馏水的容器中，水浴加温透析，并保持一定液面。透析过程中经常更换透析袋外的蒸馏水，以保持膜内外有较大浓度差。（2）应用透析法去除鞣质时，可在中药提取液中加入适量明胶溶液，使其与鞣质结合成大分子而不易透过透析膜。但提取液中若含有黄酮、蒽醌类成分，则不宜加入明胶溶液。（3）透析速度不仅取决于透析膜孔径的大小、溶液的温度及透析膜两侧溶液的浓度差等因素，还与溶液的电荷有关。（4）判断透析是否完全，可用定性反应检查膜内药液有效成分或指标成分。第71页,共74页，星期六，2024年，5月二、分馏法原理：分馏法是分离液体混合物的一种方法，利用混合物中各成分沸点不同，在分馏过程中产生高低不同的蒸气压，借以收集不同温度的馏分，达到分离目的。分馏法是将多次蒸馏的复杂操作在一支分馏柱中完成。一般情况下，液体混合物沸点相差100℃以上时，可用反复蒸馏法；沸点相差25℃以下时，需用分馏法；沸点相差越小，则需要的分馏装置越精细。第72页,共74页，星期六，2024年，5月第73页,共74页，星期六，2024年，5月分馏装置：多一个分馏柱第74页,共74页，星期六，2024年，5月适用范围

CCD法具有很强的分离混合物各组分的能力中等极性、分离因子较小及不稳定的物质高分子化合物如多肽、蛋白质等（色谱法不能分离的）。不适合分离微量成分、试样极性过大或过小、或分配系数受温度或浓度影响过大及易于产生乳化现象的溶剂系统。第37页,共74页，星期六，2024年，5月优缺点：优点：高效率，操作条件温和、试样易回收等优点。对于非常相似性质的混合物分离效果好。缺点：操作繁琐，溶剂消耗大，萃取管易因机械振荡而损坏，微量成分易损失，反复多次振动溶剂系统易产生乳化现象。第38页,共74页，星期六，2024年，5月4.液滴逆流分配法

液滴逆流分配法（dropletcountercurrentchromatography,DCCC）又称液滴逆流色谱法，是在逆流分溶法的基础上改进的两相溶剂萃取法。其原理类似于逆流分溶法，利用混合物中各成分在两液相间的分配系数的差异，让移动相以液滴的形式通过固定相的液柱，实现逆流分配，从而达到分离纯化的目的。第39页,共74页，星期六，2024年，5月仪器装置该装置有3个部分组成。输液部分。包括微型泵、移动相溶剂储槽和试样液注射器。萃取部分。由300～500根内径约2mm、长度为20～40cm的萃取管连接而成。收集检出部分。包括检出器及分步自动收集仪。第40页,共74页，星期六，2024年，5月第41页,共74页，星期六，2024年，5月适用范围目前DCCC法广泛用于皂苷、生物碱、酸性成分、蛋白质、糖类等天然产物的分离和精制，特别是用于皂苷类的分离，并取得良好效果。优缺点使用溶剂较少，可定量回收试样，因不需振荡，故不会产生乳化，分离效果较CCD法好（移动相形成液滴，与萃取管固定相接触摩擦）。可用氮气驱动避免物质氧化例子：柴胡皂甙、原小檗碱型季铵碱的分离第42页,共74页，星期六，2024年，5月（1）简单萃取法适用于分配系数差异较大成分分离。（2）逆流连续萃取适用于各种密度的溶剂萃取。避免乳化。（3）CCD法适用于分离中等极性、分离因子较小及不稳定的物质。操作繁琐，溶剂消耗大，易乳化。（4）DCCC法适用于分离纯化多种天然药物化学成分。溶剂使用少，可定量回收。（5）因选择β值大的溶剂系统；亦可根据β选择适当萃取方法。小结第43页,共74页，星期六，2024年，5月第三节沉淀法第44页,共74页，星期六，2024年，5月沉淀法：是在天然药物的提取液中加入某些试剂，与其中成分发生沉淀反应生成沉淀或降低其溶解性而从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法。条件：采用沉淀法分离化合物，若生成沉淀的是有效成分，则要求沉淀反应必须是可逆的；若沉淀物为杂质，则沉淀反应可以是不可逆的。第45页,共74页，星期六，2024年，5月沉淀法操作步骤：