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大球盖菇菌种生产技术规程

1范围

本标准规定了制作大球盖菇菌种生产的范围、规范性引用文件、术语和定义、场地要求、一级种、二级种和三级种生产技术流程要点等。

本标准适用于生产企业或专业合作社生产大球盖菇一级种、二级种和三级种。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB191包装储运图示标志

NY/T528-2010食用菌菌种生产技术规程

《食用菌菌种管理办法》中华人民共和国农业部令第62号

3术语和定义

NY/T528-2010中确定的术语和定义适用于本文件。

大球盖菇StrophariarugosoannulataFarl.exMurrill隶属于伞菌纲Agaricomycetes、伞菌目Agaricales、球盖菇科Strophariaceae。

4场地要求

选择地势高燥，通风良好，排水畅通，交通便利的场地。要求300m内无畜牧舍、垃圾场、食用菌栽培场等。厂房有各自隔离的原材料库、配料分装室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、储存室、菌种检验室等。

5一级种制作

5.1容器规格

使用玻璃试管或培养皿。试管的规格为18mm×180mm或20mm×200mm。棉塞要使用梳棉或化纤棉，不应使用脱脂棉，也可用硅胶塞代替棉塞。

5.2培养基配方

一般使用马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。

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5.3灭菌

培养基配制后应在4h内进锅灭菌，0.11MPa~0.12MPa保持30min。

5.4灭菌效果检查

随机抽取3%~5%的试管，直接置于28℃恒温培养，48h后检查，无微生物长出的为灭菌合格。

5.5接种

自然冷却至室温后，在无菌室或超净工作台严格无菌操作接上大球盖菇菌种，做好标记。

5.6培养

接种好的试管或培养皿放置25℃恒温培养箱中培养，定期检查，及时挑出不合格的大球盖菇菌种。菌丝长满三分之二时放入4℃冰箱备用。整个过程做好入库、记录、留样工作。

6二级种制作

6.1菌袋规格

选择15cm×28cm的耐高压聚丙烯塑料袋。

6.2培养料配方

阔叶树木屑70%，麸皮18%，生石灰1%，石膏1%，含水量58%±2%。

6.3灭菌

培养料配制后应在4h内进锅灭菌，0.12MPa保持1.5h，自然降温。

6.4灭菌效果检查

随机抽取1%的菌袋，直接置于28℃恒温培养，48h后检查，无微生物长出的为灭菌合格。

6.5接种

菌袋自然冷却至室温后，在无菌室或超净工作台严格无菌操作接上大球盖菇一级种，做好标记。

6.6培养

将接好一级种的菌包放置25℃恒温避光的培养室培养，菌丝快要长满菌袋时，将培养温度降低至22℃,定期检查，及时挑出不合格的大球盖菇菌种。整个过程做好入库、记录、留样工作。

7三级种制作

7.1菌袋规格

选择12cm×24cm的聚丙烯塑料袋。

7.2培养料配方

发酵阔叶树木屑70%，麸皮18%，生石灰1%，石膏1%，含水量58%±2%。

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7.3灭菌

培养料配制后应在4h内进锅灭菌，0.12MPa保持1.5h，自然降温。

7.4灭菌效果检查

随机抽取1%的菌袋，直接置于28℃恒温培养，48h后检查，无微生物长出的为灭菌合格。

7.5接种

菌袋自然冷却至室温后，在无菌室或超净工作台严格无菌操作接上大球盖菇二级种，做好标记。

7.6培养

将接好二级种的菌包放置25℃恒温避光的培养室培养，菌丝快要长满菌袋时，将培养温度降低至22℃,定期检查，及时挑出不合格的大球盖菇菌种。整个过程做好入库、记录、留样工作。

8标签、标志、包装、运输和贮存

8.1标签、标志

出售的大球盖菇菌种应贴标签。注明菌种种类、品种、级别、接种日期、生产单位、地址电话等。外包装上应有防晒、防潮、防倒立、防高温、防雨、防重压等标志，标志应符合GB191的规定。

8.2包装

一级种的外包装用木盒或有足够强度的纸盒，二级种和三级种的外包装用木箱或有足够强度的纸箱，箱内或盒内除菌种外的空隙用轻质材料填满塞牢。

8.3运输

各级菌种运输时不得与有毒有害物品混装混运。运输中应有防晒、防潮、防雨、防冻、防震及防止杂菌污染的设施与措施。

8.4贮存

应在干燥、低温、无阳光直射、无污染的场所贮存。大球盖菇一级种