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第77页,共86页,星期六,2024年,5月防止空气污染接种时在近火焰处打开瓶口,使瓶口倾斜,以免空气中微生物落入瓶中第78页,共86页,星期六,2024年,5月防止操作带来的污染接种过程中尽可能达到悬空要求第79页,共86页,星期六,2024年,5月防止操作带来的污染瓶盖朝上放,接种完毕后立即改好瓶盖第80页,共86页,星期六,2024年,5月第81页,共86页,星期六,2024年,5月第82页,共86页,星期六,2024年,5月第83页,共86页,星期六,2024年,5月第84页,共86页,星期六,2024年,5月第85页,共86页,星期六,2024年,5月第86页,共86页,星期六,2024年,5月5、原球茎型原球茎型:种子消毒后,在培养基上播种,经一段时间培养而发生原球茎(带芽),然后由原球茎直接长成植株。兰属特有的器官发生方式。第45页,共86页,星期六,2024年,5月兰花的萌发第46页,共86页,星期六,2024年,5月兰花的启动第47页,共86页,星期六,2024年,5月兰花的增殖第48页,共86页,星期六,2024年,5月兰花的分化第49页,共86页,星期六,2024年,5月培养的兰花第50页,共86页,星期六,2024年,5月第51页,共86页,星期六,2024年,5月第52页,共86页,星期六,2024年,5月二、离体快速繁殖商业性生产的范围及应用通过离体快速繁殖能生产种苗的植物种类很多,但大部分植物因一些关键技术尚未突破,繁殖系数较低、成本过高以及市场需求不大等而未能进行规模化和商业化生产。目前离体快速繁殖在生产中的应用主要有以下几个方面:(1)用于稀缺或急需良种植物的繁殖。一些新选育或新引进的良种由于生产上需求的苗木多而急,用常规繁殖速度慢,短时间内无法满足,因此多尝试用离体快速繁殖方法来解决。这方面已有火炬松、香蕉、桉树、杨树、枣树、葡萄、山葡萄、杜鹃、樱桃、除虫菊、非洲菊、月季、苹果、甘蔗、马铃薯、枸杞、木薯、甘薯、香石竹、大丁草、苎麻及其他果树及砧木等植物的相关报道。我国采用离体快速繁殖技术解决生产问题取得了较大的成功。如广西建立了我国第一个年产甘蔗试管苗300万株的工厂,使原需要10年才能扩大繁殖用于生产的良种缩短为2年。第53页,共86页,星期六,2024年,5月(2)用于茎尖脱毒及无病毒苗木试管快速繁殖。利用茎尖培养或热处理后再培养,经检测无病毒后再用试管加快繁殖,可获得大量无病毒苗木。这是消除植物病毒病最有效的方法,也是试管繁殖用于生产最有成效的又一个方面。在国外,40%~80%草莓是通过试管脱毒后繁殖的。我国每年生产各类脱毒试管苗达1000万株,经济和社会效益都十分显著。
(3)用于自然界无法用种子繁殖或难以保持后代一致的三倍体、单倍体及基因工程植株的快速繁殖。如超雄性石刁柏是我试管繁殖。
(4)濒临植物的拯救。一些珍稀植物或濒临、濒危灭绝植物,数量极少,若不加以保护及扩大繁殖,就有绝灭的可能。通过试管保存及扩大繁殖,则可以避免灭绝。例如,成都生物研究所成功地运用试管繁殖珍稀植物猀椤,现已在峨眉山建立起人工猀椤林;第54页,共86页,星期六,2024年,5月(5)用于种质的试管保存及交换。利用试管保存植物种质资源,具有体积小、保存数量多、条件可控制、避免病虫害再度污染、节省人力和土地以及便于国家和地区间的转移和交换等特点。近10多年来,该项技术有了长足的进步,可用低温和超低温方法保存种质。这是一条经济而有效的途径。特别是对于一些无性繁殖的植物和脱毒品种,市场一旦需要即可大量繁殖。德国许多植物组织培养室成为种质保存和繁育中心。国际马铃薯中心专门负责马铃薯种质的试管保持及国际交换。
第55页,共86页,星期六,2024年,5月三、离体快速繁殖体系的建立1、无菌培养系的建立任何植物细胞或组织培养体系的建立,都必须选用适宜的外植体。所谓外植体,就是第一次接种用的植物材料。虽然几乎任何植物组织或器官均可作外植体,但具体采用何种组织或器官因培养体系的目的和接种的植物种类的不同而有所不同。通常木本植物、较大的草本植物以茎段比较适宜,能在培养基的诱导下萌发出侧芽,成为进一步繁殖的材料。一些草本植物比较容易繁殖,或本身短小或缺乏显著的茎,也可采用叶片、叶柄、花萼、花瓣等作为外植体。外植体选择好后,到田间或盆栽植物中选取洁净、无病虫害的植株,剪去比较幼嫩部分、生长能力较强的部位。样品采得后,保持其新鲜,迅速带回,在流水中冲洗1—2个小时,然后在超净操作台上用0.5%的升汞或其他表面消毒剂消毒,用无菌水冲洗3—4遍后,接种于灭菌的培养基上。如果外植体污染率小或没有污染,获得了无菌材料
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