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三、纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有:纯化大肠杆菌制备牛肉膏蛋白胨固体培养基2、平板划线法平板划线法和稀释涂布平板法3、稀释涂布法系列稀释操作:涂布平板操作涂布平板操作1、接种最常用方法有:2、平板划线法3、稀释涂布法(二)纯化大肠杆菌(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后,观察并记录四、菌种的保藏01斜面保藏临时保存02甘油保藏长期保存3、某种微生物数量的测定添加标题01单击此处添加小标题02单击此处添加小标题03单击此处添加小标题04生长:个体体积的增加繁殖:个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长,这一点与研究大生物时有所不同。细菌太小,往往讨论其群体生长。微生物生长概述以数量变化对微生物生长情况进行测定单击此处添加正文。稀释平板计数法单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖→肉眼可见的菌落→对菌落数目的计数推测样品中的微生物细胞数对样品进行适当稀释→同一稀释度三个以上重复,取平均值;添加标题每支移液管及涂布器只能接触一个稀释度的菌液;添加标题样品充分混匀;添加标题每个平板上的菌落数目合适,便于准确计数;添加标题要求:添加标题每克样品中的菌株数=(C/V)*M添加标题2.显微镜直接计数法采用细菌计数板或血球计数板,显微镜下直接计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)。取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加盖血盖片。取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。用10×镜观察并将计数室移至视野中央。在10×镜下计数:计数4个(或5个)中格的平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上16(或25)就得出计数区总菌数,最后再换算到每mL菌液中的含菌数。注意事项:计上不计下,计左不计右。出芽计一半必修3P680102显微镜直接计数法缺点:1不能区分死菌与活菌;2不适于对运动细菌的计数;3需要相对高的细菌浓度;4个体小的细菌在显微镜下难以观察;5**2微生物的培养与分离3某种微生物数量的测定1微生物的培养与利用6发酵过程中亚硝酸盐含量的测定5利用微生物进行发酵来生产特定的产物4培养基对微生物的选择作用微生物原核生物界原生生物界真菌界病毒界一、微生物的类群(细菌、放线菌、蓝藻)(酵母菌、霉菌、大型真菌)(草履虫、变形虫、衣藻)(噬菌体、艾滋病毒)特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.类群结构特点遗传物质繁殖方式举例病毒原核生物界真菌界原生生物界无细胞结构原核(细胞壁、膜、质)真核(细胞壁、膜、质、核)真核(细胞膜、质、核)噬菌体烟草花叶病毒流感病毒细菌(形状菌)放线菌霉菌、蘑菇、酵母菌衣藻、草履虫、变形虫DNA或RNADNADNADNA增殖:吸附→注入→合成→装配→释放分裂生殖(二分裂)孢子生殖出芽生殖分裂生殖有性生殖拟核,大型环状DNA质粒(含抗生素抗药性,固氮基因)其成分为肽聚糖芽孢细菌的休眠体,对恶劣的环境有抵抗力细菌的营养异养型自养型蓝藻硝化细菌等寄生腐生菌落可作为菌种鉴定的重要依据细菌的代谢自养01添加标题硝化细菌、铁细菌、硫细菌等。02添加标题异养03添加标题大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。04添加标题枯草杆菌、硝化细菌、铁细菌、根瘤菌等。05添加标题破伤风杆菌、乳酸菌等。06添加标题需氧型:07添加标题厌氧型:08添加标题二、培养基:010225%50%1、概念:培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。2、营养成份:营养成份:水、碳源、氮源、无机盐其它:PH、特殊营养物质、氧气(P15)培养基的类型和用途单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。(3)按成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。03单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,为了演示发布的良好效果,请言简意赅地阐述您的观点。(2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别培养基。02其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。(1)按物理状态来分:固体培养基和液体培养基。01(4)选择培养基的常见用途
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