3-1 DNA重组技术的基本工具 课件（共26张PPT）高中生物学人教版选择性必修三.pptxVIP

2019人教版高中生物选择性必修3课件

基因工程

§3-1重组DNA技术的基本工具;

番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木

瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。

DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分

子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征;

切割DNA分子的“分子手术刀”

将DNA片段连接起来的“分子缝合针”

将体外重组DNA分子导入受体细胞的“分子运输车”;

提示：原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，所以它在长期的进化过

程中形成了一套完善的防御机制。限制酶就是它的一种防御性工具。当外源

DNA入侵时，它会利用限制酶来切割外源DNA,使之失效，以保证自身的安全。;

作用

能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

特点

大多数限制酶的识别序列由6个核苷

酸组成。例如，EcoRI、SmaI限制酶

的识别序列均为6个核苷酸，也有少

数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。;

限制酶是如何命名的呢?是用生物属名的头一个字母与种加词的头两个

字母，组成了3个字母的略语，以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如，一种限制酶是从大肠杆菌(Escherichiacoli)的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成EcoRI。;

限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

结果

DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：

■黏性末端：

限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开。;

限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

结果

DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：

■黏性末端：

限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开。

■平末端：

限制酶在它识别序列的中心轴线处切开。;

限制性内切核酸酶——??分子手术刀”;

1967年，世界上几个实验室几乎同时发现了一种能够将两个DNA片段连接起来的酶，称之为DNA连接酶(DNAligase)。;

种类

■E·coliDNA连接酶：

●来源：从大肠杆菌中分离得到的

●作用：只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来。

■T4DNA连接酶：

●来源：从T4噬菌体中分离出来的

●作用：可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端和平末端，但连接平末端的效率相对较低。;

【提示】不是一回事。虽然DNA连接酶和DNA聚合酶都是催化磷酸二酯键形成的酶，但两者存在显著的区别。

(1)DNA聚合酶只能催化单个核苷酸加到已有的核酸片段3末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是催化单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。

(2)DNA聚合酶以一条DNA链为模板，催化形成与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段连接起来，它不需要模板。

此外，两者虽然都是蛋白质，但它们的组成和性质各不相同。;

作用

将外源基因送入细胞

种类

质粒(常用)

载体的种类

噬菌体、动植物病毒等

它们的来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。;

请在两张纸上分别写上下列两段DNA序列：

5-ATTGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC-3

3-TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG-5

5-TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC-3

3-AGGATCTTAAGAGCCATAC