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手工及自动化文库制备工作流程及防止污染要点
移液工作站式建库仪全自动封闭式建库仪
文库制备方式手工法建库
(自动化)(自动化)
PCRPCR
扩增子法:通过多重进工作站台面上整合温控模块、建库平台内置温控模块、模块
行靶基因富集,引物消化,连PCR仪、振荡模块、磁力架模等多种功能模块,结合预装试剂的
接测序接头进行文库制备,纯块的多种功能模块,通过机械臂单样本封闭式卡盒在独立封闭空间
化文库产物。进行移液、移板处理。内完成文库制备,可有效避免样本
捕获法:通过片段化,加接头,关键仪器设备:内置PCR扩增制备过程中交叉污染。
纯化产物PCR扩增,探针杂仪的移液工作站关键仪器设备:单样本封闭卡盒式
工作流程
交捕获,产物PCR扩增进行建库设备
靶基因富集,连接测序接头和
index进行文库制备,纯化文
库产物。
关键仪器设备:PCR扩增仪,
磁力架
1.游离核酸及组织核酸的建库文库制备完成后,从卡盒内取出文
实验操作,以及PCR扩增前后库时可能有气溶胶产生。
建库环节操作步骤多,包括几实验操作在同一个区域内完成,
污染风险点十次开放式人工开盖和移液全过程都涉及开盖操作,污染风
操作,污染风险较高险较高;
2.扩增产物和气溶胶富集在工
作站内,不易排除
1.实验室各功能区进行严格取出文库的(开盖)操作可以在通
1.每次实验结束后进行工作站
的物理分隔,防止污染;风柜中完成,有效清除气溶胶污染。
内清洁消毒,使用紫外照射;
2.每个房间持续有效通风换
2.工作站内使用过程中建议通
气,特殊房间要进行全置换空
过空气全置换降低扩增产物和
防污染要素气,保证房间之间的静态压差
气溶胶的污染;
平衡和动态压差平衡,防止污
3.组织核酸样本和游离核酸样
染;
本,要在不同工作站进行建库,
3.关键环节进行标准化和质
防止交叉污染。
控。
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