番茄细菌性软腐病抗病性鉴定技术规程（征求意见稿）.docx

ICS65.020.20CCSB31

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辽宁省地方标准

DB21/TXXXX—2024

番茄细菌性软腐病抗病性鉴定技术规程

Technicalregulationforevaluationoftomatoresistancetobacterialsoftrot

（送审讨论稿）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

辽宁省市场监督管理局发布

I

DB21/TXXXX—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。

本文件起草单位：辽宁省农业科学院、铁岭市农业科学院、新民市乡村振兴发展中心、台安县农业农村发展中心、北镇市农业农村综合服务中心

本文件主要起草人：王辉、刘丽、于舒怡、关天舒、陈乐、李柏宏、刘长远、刘震、吴媛媛、郑丽娇、刘斯、周颖

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024文件起草单位通讯地址：辽宁省农业科学院（沈阳市沈河区东陵路84号），联系电话：024

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番茄细菌性软腐病抗病性鉴定技术规程

1范围

本文件规定了番茄细菌性软腐病[Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum]抗病性鉴定过程的准备、接种、调查和评价等技术内容。

本文件适用于番茄（Tomato）品种或种质资源对细菌性软腐病抗性的室内鉴定及评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T1858.3—2010番茄主要病害抗病性鉴定技术规程第3部分：番茄抗枯萎病鉴定技术规程

SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则

DB21/T3417—2021设施番茄育苗及绿色生产技术规程

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4准备

4.1培养基制备

肉汁胨培养基（NA）：牛肉浸膏3.0g，酵母浸膏1.0g，蛋白胨5.0g，葡萄糖（或蔗糖）10.0g，琼脂粉10.0g，蒸馏水1000mL，pH6.8～7.0，高压灭菌121℃20min。

结晶紫聚果胶培养基（CVP）：将搅碎器预热，加500mL煮沸的蒸馏水，将以下成分依次加入，用低速搅拌。结晶紫的10%水溶液1.0mL，1.0mol/L氢氧化钠溶液4.5mL，二水合氯化钙1%水溶液（现配现用），琼胶2.0g，硝酸钠1.0g，随后将聚果胶酸钠加入，高速搅拌15s，分装三角瓶，高压灭菌121℃15min后立即倒入培养皿，制成平板。

4.2接种体制备

4.2.1病原物分离

从发病植株典型病斑上采集病样，在结晶紫聚果胶培养基（CVP）上采用培养皿稀释分离法或平板划线分离法进行分离，挑取单个菌落进行纯化培养，经柯赫氏证病法则测定后，对纯化的分离物进行形态学、分子学鉴定等，确定为番茄细菌性软腐病病原菌，并将该病菌4℃保存备用。病原物的分离与鉴定符合SN/T1538.1的要求。

4.2.2接种体制备

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平板计数法测定菌悬液浓度，配制成5×107cfu/mL病菌悬浮液，供接种使用。

4.2.3菌种保存

4.2.3.1斜面保存：将纯化的病原物划线转接到NA试管斜面培养基上，28℃恒温培养36h～48h，

待病菌长满斜面后放4℃条件下冷藏保存，保存期为1周～10周。

4.2.3.2超低温甘油保存：将获得的病原菌在NA平板培养基上培养，28℃恒温培养36h～48h，用

接种环挑取病原菌放入装有灭菌的甘油（甘油:水=1:4）冻存管中混匀，放于-80℃超低温冰箱下长期保存。

4.3鉴定对照品种

抗病性鉴定时选择“Moneymaker”为感病对照品种。