食品生物技术基础复习总结.docVIP

绪论

基因工程

概念理解

生物技术：生物技术是指综合运用现代生物学、化学和工程学的手段，直接或间接地利用生物体、生命体系和生命活动过程生产有用物质的一门高级应用技术科学。

生物技术主要包括细胞工程、发酵工程、酶工程和基因工程四大领域。

食品生物技术：是现代生物技术在食品领域中的应用，是指以现代生命科学的研究成果为根底，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料。

基因工程：就是按照预先设计的生物改造蓝图，在分子水平上对基因进行“切割”和“粘接”，人为的用一种生物组织中的基因替换另一种生物组织中的基因，实现基因定向转移和重新组合，以到达定向改变生物遗传性状的目的。

所谓基因工程，就是利用DNA体外重组或扩增技术从供体生物基因组中别离感兴趣的基因或DNA片段，或是经过人工合成的方法获得基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反响产生重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。

食品基因工程：利用基因工程的技术和手段，在分子水平上定向重组遗传物质，以改进食品的品质和形状，提高食品的营养价值、贮藏加工性状以及感官性状的技术。

基因重组：利用限制性内切酶和其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因，并将两者连接起来。

克隆〔Cloning〕：外源基因的无性繁殖。具体指目的基因与载体连接成重组DNA以后，将其导入受体细胞进行扩增和筛选，到达大量的重组分子的过程。〔大肠杆菌是目前基因工程中最常用的受体细胞。〕

基因食品：转基因食品是利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其他物种中去，使其性状、营养品质、消费品质向人类所需要的目标转变。转基因食品大致可以分为两大类，一是改造现有的基因，使一些性状不表现出来；另外一类是导入其他的基因，从而产生新的性状。

思考题

什么是基因重组？DNA重组实验包括哪几个步骤？

答：基因重组就是利用限制性内切酶和其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因，并将两者连接起来。一个典型的DNA重组实验包括以下几个步骤：①提取工体生物的目的基因〔或称外源基因〕，通过限制性内切酶、DNA聚合酶连接到另一个DNA分子上〔克隆〕，形成一个新的重组DNA分子；②将重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化〔transformation〕；③对吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定；④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外源基因是否表达。

什么是限制性内切酶(RE)？简述其分类、特点及作用。〔P30〕

限制性内切酶是能够在特定部位限制性的切割DNA分子的内切酶。

限制性内切酶分类：

I型：由三个基因构成，hsdR；hsdM；hsdS位于染色体上，三个基因构成一个复合体，限制酶需要ATP、Mg2+、SAM〔５—腺苷甲硫氨酸〕。

II型：限制与修饰基因产物独立起作用，在Ｅ.coli中这两种基因位于质粒上。

III型：修饰酶与Ｉ型酶相同，hsdＭ与hsdＳ基因产物结合成一亚单位，限制酶是独立存在的。

限制酶的特点：识别顺序和酶切位点；识别４-8个相连的核苷酸；富含ＧＣ；对称性〔回文结构〕；切点大多数在识别顺序之内，也有例外；限制酶切后产生两个末端，５’-Ｐ和３’-ＯＨ。

限制酶的用途:DNA重组；限制酶〔物理〕图谱绘制；突变分析〔RFLP分析〕；限制酶的局部酶切与完全酶切。

在特异位点上切割DNA，产生特异的限制性内切酶切割的DNA片段；

建立DNA分子的限制性内切酶物理图谱；

构建基因文库；④用限制性内切酶切除相同的粘性末端，以便重组DNA。

PCR技术的根本原理。

答：多聚酶链式反响简称PCR〔英文全称：PolymeraseChainReaction〕。

PCR反响体系应具备以下条件：①要有与被别离的目的基因的DNA双链两端序列互补的DNA引物〔约20个碱基左右〕；②具有热稳定性的酶，如TaqDNA聚合酶；③dDTP；④作为模板的目的DNA序列。

PCR反响过程包括：①变性。即将模板DNA至于95℃的高温下，使双链DNA的双链解开变成单链DNA；②退火。将反响体系的温度降低至55℃左右，使得一对引物能分别与变性后的两条模板链相配对；③延伸。将反响体系温度升高到TaqDNA聚合酶作用的最适温度72℃，然后以目的基因为模板，合成新的DNA链。

基因工程在食品产业中的应用。

答：

利用基因工程改造食品微生物：①改进微生物菌种——基因工程菌；例：面包酵母菌——促进发酵，啤酒酵母菌。②微生物酶分子的人工进化。

利用基因工程改善食品原料的品质：①蛋白质类食品原料②油脂类食品原料③碳水化合物类食品原料

利用改进食品生产工艺：①利用DNA重组技术改进果糖和乙醇生产方法②改进啤酒大麦的加工工艺③改进小麦种子贮藏蛋白的烘烤特性④改善