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第3章基因工程
第1节重组DNA技术的基本工具
人教版高中生物选择性必修三;
转基因抗虫棉;
DNA重组技术。
【归纳定义】工程别名:DNA重组技术操作对象:基因
操作水平:DNA分子水平工程实质:基因重组;
理论基础
【问题2】为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?
I·DIHJ尘什=五十一THTJP人处-TT刀儿丰人A父1
2.都遵循碱基互补配对原则
3.DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构;
1.基因是什么?基因是有遗传效应的DNA片段。
2.基因的功能是什么?
基因通过控制蛋白质的合成,直接或间接控制生物的性状。
DNA
转录(RNA聚合酶)
mRNA
翻译
蛋白质——体现相关的生物性状;
①组成元素:CHONP
②DNA中文全称:脱氧核糖核酸
③基本单位:脱氧核糖核苷酸=磷酸+脱氧核糖+含氮碱基;
磷酸
脱氧核糖
磷酸二酯键
磷酸
脱氧核糖;
双螺旋结构;
DNA的结构特点:
①DNA是由两条单链组成的,这两条链按反向平行方式盘旋成双螺旋结构。
②脱氧核糖和磷酸交替连接,排
列在外侧,构成基本骨架;碱基
排列在内侧。
③两条链上的碱基通过氢键连
接成碱基对,且遵
循碱基互补配对原则。;
简图
…ATGCCGTGGAATTCC
……TACGGCACCTTAAGG
①磷酸二酯键②氢键;
▲图3-1重组DNA技术所需的三种基本工具示意图
基因工程—;
2、种类:数千种(限制酶不是一种酶,而是一类酶)
3、特点:能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。;
分子手术刀----限制性内切核酸酶
限制酶;
①大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。
②呈现碱基互补对称,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的,称为回文序列。;
1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征(D)
A.GAATTCB.GGGGCCCC
CTTAAGCCCCGGGG
C.CTGCAGD.CTAAATC
GACGTCGATTTAG;
菌株型号
种加词头两个字母
属名首字母;
EcoRI限制酶的切割:只能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。
黏性末端
GAA…TTC;
Smal限制酶的作用:只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切
口,是平整的,这样的切口叫平末端。;
平末端平末端
基因工程 ;
分子手术刀----限制性内切核酸酶;
AATTC…..…Bt…....G
目的基因G……基因……CTTAA
(1)该DNA片段上EcoRI的识别序列在哪儿?
(2)请用剪刀模拟EcoRI的识别序列和切割位点将目的基因“切割”下来。;
AATTC..…Bt..…G
目的基因G...基因……CTTAA
如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割,会怎样?
会产生相同的黏性(平)末端;
④AATTC..
G...
D.以上都不对
23;
之间的磷酸二酯键。
2.种类:(1)E·coliDNA连接酶
(2)T4DNA连接酶;
分子缝合针----DNA连接酶
3、DNA连接酶的缝合作用
可把黏端之间的缝隙AA
“缝合”起来
两DNA片段要具有互补的
黏性末端才能拼起来
AT
G
CTTAA;
(1)E·coliDNA连接酶或T?DNA连接酶连接粘性末端
AATT;
(2)T4DNA连接酶连接平末端,效率低;
类型;A;
名称;
反馈练习;
质粒
2.种类:动植物病毒
噬菌体
质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,
并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。
基因工程;
3、运载体需具备的条件
(1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存
能进入受体细胞并在受体细胞内
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