显微镜的使用.ppt

实验一显微镜的使用

机械装置由镜座、镜臂、镜筒与物镜转移器、载物台、移动器粗细调节器组成。2光学系统由目镜、物镜、聚光镜、反光镜、光圈组成。目镜：装在镜筒的上端，一般各有8x、10x、15x、16x等种不同的放大倍数的目镜。目镜只能把物镜成的像再次放大，没有辨析能力。物镜：显微镜的物镜是由一组特殊的透镜组成。一般有低倍镜（10x）、高倍镜（40x）和油镜（100x），它们各有一定的放大率，不仅可以放大标本，而且有辨析能力。12345低倍镜：它的视野的实际范围最大，易于发现目标，但不易看清微生物个体的形态。高倍镜：搞倍镜视野的实际范围较低倍镜小些。可以看清个体较大的微生物个体或菌丝体形态，但个体较小的微生物以及其内含物和特殊结构也无法辨清。油镜：一般在镜头上有黑圈或红圈表示的为油镜物镜，也有的以“OI”或“HI”字样表示，油镜的镜面很小，工作距离很近。使用时，在载玻片和油镜物镜之间加上一低油（常用香柏油）（而使用低倍、高倍镜时，是隔以空气）。当光线通过载波片时，由于玻璃与香柏油的折射率相近，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射，这样就可以增加照明度，是镜检物清晰（参见表1）。010302介质空气水石蜡油香柏油玻璃折射率1.01.331.471.5151.52R=0.5波长/N.AN.A=n.sina/2显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸枯草杆菌（Bacillussubtillis）菌株载波片、无菌水材料仪器1操作步骤：置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台过沿约为一寸左右，镜检者姿势要端正。一般用左眼观察，右眼便与绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳。调光：一般采用散射光，如果光线弱时可用日光灯。2（1）低倍镜旋到镜筒下方，旋转粗调节器。是镜头与载物台相距0.5cm。（2）打开聚光器，使之与载物台同样高度。（3）左眼看目镜，观察光源强弱，使全视野内均匀明亮。凡检查染色体标本时，光线就强，检查为染色标本时，光线不以太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器，旋转反光镜调节光线。3、低倍镜观察待见标本必须先用低倍镜观察，因为低倍镜视野较大，已发现目标和确定检查位置将待检标本置镜台上，用标本夹夹住，移动推动器，使观察标本处于接物镜正下方。眼由左侧水平测视显微镜平台，转动粗落选，使接物镜下降之距标本约0.5cm处由接目镜观察。然后慢慢地提升镜筒，直到视野内出现物像后，改用细调节器，调节到物像清楚为止，认真观察标本各部位，找到目的物并将其移到视野中心，准备用高倍镜观察。将高倍镜转正至镜筒正下方。在转换时，需用眼在侧面观察，避免镜头与玻片相幢。从接目镜观察，再仔细调节光圈。使光线明亮度适宜。同时用粗调节器慢慢提升镜筒至出现物像后，改用细调节器调节至物像清楚为止。找到最适当于观察的部位区，移至视野中心，准备用油镜观察。将油镜转至正下方，用粗调节器将油镜头升约距平台2cm。高倍镜观察油镜观察手执玻片标本，在镜检部位滴上一滴香柏，油小心将此玻片进入显微镜平台。从目镜观察，进一步调节光线，使视野达到最高程度（全开虹彩光圈）。小心下降镜筒：以粗调下降镜头，此时从侧面注视油镜慢慢浸在香柏油中，几乎与标本相碰，特别注意：不能将油镜头压在标本上，更不能用力过猛，否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。用粗调节器将镜筒徐徐上升（此时不准下降镜筒）。直到视野出现模糊物像为止，然后再用细调节器校正焦距。如果油镜头已离开泽面而仍未见物像，用粗调节器将油镜升高距平台约2cm后，必须在从侧面观察，将油镜下降重复，上述操作到物像看清为止。观察完毕，上旋镜筒，取出标本片之后，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后沾取少许二甲苯。擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦去残留的二甲苯。勿用手或其他纸擦镜头，以免损坏镜头。用绸布擦镜显微镜的机械部分用同样的方法观察各个待检染色体标本。并绘出形态图。将各部分还原，反光镜垂直于镜座、将物镜转成八字形在向下旋，同时把聚光镜降下，才可以镜入镜箱内。注意事项：使用油镜之前须如上述顺序，先用低倍镜找到被检物，然后转换成高被镜，将被检物观察的部位移至视野中心，然后转换油镜观察取显微镜时，必须一手拿镜臂，另一手托住镜座，并保持镜身上下垂至切不可一只手提起，以免坠落和甩出反光镜及目镜。由于油镜工作距离很短，因此用粗条路螺旋下降镜筒时，一定要从侧面注视油镜头移动情况，在进行观察时，只能在油镜头提升过程找物像，而绝不能用粗调螺旋或细调螺旋将镜头下降，以防镜头与标本相碰撞。2341镜检完毕后，及时用擦镜纸擦去残油，再用二甲苯擦净，最后用一张擦镜纸擦去二甲苯，防止损坏镜头。简单染色：掌握细菌的普通染色法和革兰