药物的含量测定方法与验证.ppt

四元泵第22页，共57页，星期日，2025年，2月5日自动进样器第23页，共57页，星期日，2025年，2月5日色谱柱填充剂常用：十八烷基硅烷键合硅胶第24页，共57页，星期日，2025年，2月5日检测器第25页，共57页，星期日，2025年，2月5日测定方法1)内标法加校正因子测定供试品中主成分含量峰面积含量对照液（R）：ARCR内标液（S）：ASCS供试液（X）：AXCXf=————AS/CSAR/CRf=————A’S/C’SAx/CxCx=f·————AxA’S/C’S第26页，共57页，星期日，2025年，2月5日2)外标法测定供试品中主成分含量对照液（R）：ARCR供试液（X）：AXCX要求：进样量准确、操作条件稳定CXCRAXAR——＝——CX＝————CR·AXAR第27页，共57页，星期日，2025年，2月5日（二）GC法1.对GC仪器一般要求载气：氮气色谱柱：填充柱或毛细管柱填充柱：内径2～4mm，长1～10m，内装吸附剂高分子多孔小球或涂渍固定液的载体毛细管柱：内径0.2～0.5mm，长10～100m，一般为空心柱，内壁或载体经涂渍或交联固定液检测器：氢火焰离子化检测器色谱图：30分钟内记录完毕2.色谱适用性实验：同HPLC3.测定法：同HPLC第28页，共57页，星期日，2025年，2月5日第四节药品分析方法验证目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。起草药品质量标准生产工艺变更制剂组分改变原分析方法修订验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性均需对分析方法进行验证第29页，共57页，星期日，2025年，2月5日一、准确度（accuracy）：测量值与真实值接近的程度表示:回收率测定方法：回收试验加样回收试验第30页，共57页，星期日，2025年，2月5日含量测定方法的准确度1.原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测定；或与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较2.制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响①用含已知量被测物的制剂各组分混合物（包括制剂辅料）进行测定，回收率计算同原料药②向制剂中加入已知量的被测物进行测定③与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3,共9个数据来评价回收率；用UV和HPLC法时，一般回收率可达98%～102%；容量法可达99.7%～100.3%第31页，共57页，星期日，2025年，2月5日二、精密度（precision）：定义:同一样品多次测量值之间相互接近的程度表示：偏差，标准偏差,相对标准偏差1.偏差(deviation,d)d=测得值-平均值=Xi-X2.标准偏差（standarddeviation,SD或S）S=[(∑Xi–X)2/(n-1)]1/23.相对标准偏差(relativestandarddeviation,RSD)RSD=标准偏差/平均值×100%=S/X×100%第32页，共57页，星期日，2025年，2月5日重复性:同一实验室,同一人多次测定的精密度中间精密度:同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度重现性:不同实验室，不同人测定的精密度数据要求均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限第33页，共57页，星期日，2025年，2月5日三、专属性（specificity）:指在其他成分(如杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性（鉴别、杂质检查、含量测定方法，均应考察其专属性）1.鉴别反应应能与其它共存的物质或相似化合物区分，不含被测组分的样品均应呈现负反应第34页，共57页，星期日，2025年，2月5日2.含量测定和杂质测定色谱法和其他分离法，应附代表性的图谱，以说明专属性。图中注明各组分位置