病毒环境工程微生物.ppt

蛋白质衣壳：三种对称构型：立体对称型：腺病毒、疱疹病毒、脊髓灰质炎病毒螺旋对称型：烟草花叶病毒、狂犬病毒、流感病毒复合对称型：大肠杆菌T系噬菌体功能：保护病毒使其免受环境因素的影响，决定病毒感染的特异性，使病毒与敏感细胞特定部位有特异亲和力由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳第22页，共46页，星期日，2025年，2月5日核酸内芯：动物病毒：含DNA或RNA植物病毒：多数含RNA，少数含DNA噬菌体：多数含DNA，少数含RNA作用：决定病毒遗传、变异和对敏感宿主细胞的感染力被膜：也称囊膜、外膜，在核衣壳外包膜，由脂类和多糖组成。刺突：有些病毒粒子表面，尤其是在有囊膜的病毒粒子表面有突起物，也称囊膜突起，如粘病毒等。第23页，共46页，星期日，2025年，2月5日第三节??病毒的繁殖一、病毒的繁殖过程包括吸附、侵入、复制、聚集与释放四步烈性噬菌体的生活周期第24页，共46页，星期日，2025年，2月5日二噬菌体的溶源性毒（烈）性噬菌体：侵入宿主细胞后，引起宿主细胞的裂解温和噬菌体：侵入宿主细胞后，其核酸附着并整合在宿主染色体上，和宿主核酸同步复制，宿主细胞不裂解而继续进行正常的分裂繁殖溶原细胞：含有温和噬菌体核酸的宿主细胞原噬菌体：在溶原细胞内的温和噬菌体核酸溶源性：是遗传特性，原噬菌体随宿主细胞分裂传给子代细胞，第25页，共46页，星期日，2025年，2月5日第26页，共46页，星期日，2025年，2月5日第四节?病毒的测定与培养一病毒的测定病毒颗粒计数法：间接计数法：病毒感染效价测定法第27页，共46页，星期日，2025年，2月5日二病毒的培养特征（一）病毒在液体培养基中的培养特征浑浊菌悬液——接种噬菌体——透明裂解液（二）病毒在固体培养基上的培养特征噬菌斑荧光假单胞菌噬菌斑：将噬菌体接种在敏感细菌形成的菌落上，噬菌体在接种部位进行反复感染，将宿主细菌的菌落裂解成空斑，即噬菌斑。?第28页，共46页，星期日，2025年，2月5日三、病毒的培养基病毒的培养基即相对应的敏感宿主细胞，要具备如下条件：1、?必须是活的敏感动物或是活的敏感动物组织细胞2、?能提供病毒附着的受体3、?敏感细胞内没有破坏特异性病毒限制性核酸内切酶脊椎动物病毒的培养基：胚组织细胞、人组织细胞、人肿瘤细胞、动物组织细胞、鸡、鸭细胞、敏感动物植物病毒的培养基：相应的敏感植株和敏感植株的组织噬菌体的培养基：相应的敏感细菌第29页，共46页，星期日，2025年，2月5日三、病毒的培养（一）动物病毒的培养动物病毒的培养方法有动物接种、鸡胚接种和组织培养技术。第30页，共46页，星期日，2025年，2月5日1、动物病毒的空斑试验（1）单层细胞的制备和培养动物组织切成0.5-1mm3小块→洗涤→5%胰酶消化10-15min→收集细胞并计数→加入生长液并分装→37℃培养2-3d即长成单层细胞备用第31页，共46页，星期日，2025年，2月5日（2）病毒样品的采集与制备固体样品加液体培养基制成悬液，10000r/m离心10min，取上清液备用。液体样品直接离心分离。空气样品用泵抽取至长有宿主细菌的平板上，或是将长有宿主细菌的平板在空气中暴露30-60min。第32页，共46页，星期日，2025年，2月5日（3）动物病毒的接种与观察空斑：是原代细胞或传代单层细胞被病毒感染后，细胞被病毒蚀空形成的空斑（也称蚀斑）。一个空斑代表一个病毒。通过计数可知单位体积样品中的病毒数。通过病毒空斑单位（plaqueformationunit）?PFU的计数得到单位体积中含有的病毒数病毒接种适当孵育注入软琼脂或羧甲基纤维素培养形成空斑第33页，共46页，星期日，2025年，2月5日关于病毒环境工程微生物第1页，共46页，星期日，2025年，2月5日第一节病毒的一般特征及其分类病毒是没有细胞结构，专性寄生在活的敏感宿主体内，可通过细菌过滤器，大小在0.2μm以下的超微小微生物。流行性感冒病毒H1N1禽流感病毒第2页，共46页，星期日，2025年，2月5日一、病毒的特点1、个体极小。小于0.2μm的超微小微生物，可通过细菌过滤器。2、专性寄生。本身不具备独立的代谢能力，必须专性寄生在活的敏感宿主细胞内，只能在活的寄主细胞内生长繁殖，离开寄主细胞不具备任何生命特征。3、不是以二分