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植物油脂中甘油三酯和甘油二酯的组成和含量测定毛细管气相色谱法

1范围

本文件描述了用毛细管气相色谱测定植物油脂中甘油三酯和甘油二酯的组成和含量的方法。本文件适用于月桂酸含量低于1%的植物油脂。

在酸性条件下，1,2-甘油二酯（1,2-DAGs）可转化为更稳定的异构体1,3-甘油二酯（1,3-DAGs）。在储存期间，这种结构重排的速度和数量取决于油脂的酸度，并且会在两种异构形式之间达到平衡。1,2-DAGs的相对含量与油脂的新鲜度或可能的处理技术有关。可以使用1,2-DAGs与1,3-DAGs的比值作为植物油脂的质量标准。

甘油三酯图谱对植物油的指纹图谱具有潜在的意义，可能有助于检测某些类型的掺假，如橄榄油中掺入高油酸葵花籽油或棕榈油。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

油脂样品中加入内标，硅烷化处理后溶解在合适的试剂中，然后直接注入气相色谱仪进行分析。甘油三酯基于其碳原子数进行分类，甘油二酯基于其碳原子数和结构进行分类，如1,2-甘油二酯的保留时间小于1,3-甘油二酯的保留时间。

甘油二酯的不饱和结构不影响其保留时间，因此，饱和和不饱和的甘油二酯会一起洗脱，1,2和1,3-甘油二酯根据保留时间确定。1,2-甘油二酯的含量（%）通过1,2-甘油二酯的峰面积与全部甘油二酯的峰面积之和的比值确定。甘油二酯总含量（g/100g）通过内标计算。单个甘油三酯的含量（%）由该甘油三酯的峰面积与全部甘油三酯的峰面积之和的比值确定。

5仪器与设备

5.1分析天平：适用于称量精度在±0.1mg以内。

5.2装有毛细管柱的气相色谱仪：配备用于冷柱头进样的直接进样系统或程序升温汽化器。

5.3柱温箱：可程序控温。

5.4冷柱头进样器或程序升温汽化器。

5.5火焰电离检测器和信号转换放大器。

5.6积分器：与

信号转换放大器（5.5）一起使用的记录器，响应速度低于1秒，具有可变纸速或任何适合数据捕获和处理的设备。

5.7毛细管柱：熔融石英，长6m~8m，0.25mm~0.32mm，内部涂有SE52、SE54液相且厚度均匀（0.10μm~0.15μm）。

5.8微型注射器：10μL，带有用于气相色谱进样器的硬化针头。5.9微型注射器：100μL，带有硬化针头。

5.10实验室常用玻璃器皿。

6试剂与材料

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警告—请注意规定处理有害物质的规定。必须遵守技术、组织和个人安全措施。除非另有说明，均使用分析纯试剂。

6.1载气：氢气或氦气，高纯，用于气相色谱。

6.2辅助气体：

—氢气，高纯，用于气相色谱；—空气，高纯，用于气相色谱。

6.3硅烷化试剂，等体积混合：

—吡啶；

—双三甲基甲硅烷基氟乙酰胺（BSTFA）-三甲基氯硅烷（TMCS），99:1，v/v。

6.4正庚烷。

6.5参比样品：已知成分的甘油二酯标准品和甘油三酯标准品及其混合物。

6.6叔丁基甲醚。

6.7十九烷酸样品溶液（内标）：质量浓度为0.1g/100mL的甲基叔丁基醚溶液。

7试验步骤

7.1气相色谱仪和毛细管柱的准备

将毛细管色谱柱安装到气相色谱仪（5.2）上，将入口连接到进样系统，将出口连接到检测器。检查气相色谱仪的气体回路、检测器和记录器等）。

使少量气流通过色谱柱，然后打开气相色谱仪，大约4h内逐渐加热至350oC，保持该温度至少2h，然后将仪器调节到操作条件（调节气流、火焰、连接电子记录仪、调节柱温箱温度、调节检测器等）,以至少两倍于分析所需的灵敏度记录信号。基线应为线性，没有任何类型的峰，并且不能有任何漂移。

基线负漂移表明色谱柱连接不正确；正漂移表明色谱柱未正确老化。7.2操作条件

参考的操作条件如下：

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—进样器温度：必须至少比所用溶剂（正庚烷）的汽化温度（99oC）低10oC，升温程序推荐80℃

（1min），700℃/min至350℃;—检测器温度：350oC；

—柱温：起始温度为80℃,维持1min，以20℃/min的速率升至220℃,再以5℃/min的速率升至340℃,维持10min；

—载气：氢气或氦气；—进样量：5μL。

7.3测试溶液的制备

在玻璃底锥形管中准确称取100mg油并加入1mL内标溶液（6.7），将样品摇匀；用微量注射器（5.9）吸取20μL~30μL混合液，放入新的具塞玻璃管中，用平稳的氮气流吹干；加入200μL硅烷