离体肠段平滑肌生理特性.ppt

生物科学综合实验

离体肠段平滑肌的生理特性

目的要求

1．学习离体肠段平滑肌的实验方法。

2．了解肠段平滑肌的生理特性。

基本原理

1、离体实验法原理：

将离体组织器官置于模拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液，在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。

基本原理

2、哺乳动物消化管平滑肌生理特性：

具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。

但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。

这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。

动物与器材

动物：兔

仪器：麦氏浴槽、支架、烧瓶夹、酒精灯(电炉)或恒温水浴锅，烧杯(500ml3个、lOOml1个)，20ml注射器、张力传感器、计算机采集系统、二联球、温度计(2支)

药品：台氏液(配方见p220)、肾上腺素(1：10000)、乙酰胆碱(1：10000)、阿托品针剂(1支)。

方法与步骤

1．准备工作：

自由组合，6人组成一个实验小组，每个小组选出一名组长，作为实验召集人和联络人，并对实验全程负责；

以小组为单位认真研读实验教材，将实验原理和步骤熟记于心；

购买动物，要求活体，健康状况要好，不能太小也不能太老；（每个大组采购一只兔子，由大组长负责）

药品配制，主要是台式液的配制，每个大组选派1－2名成员共同配制，数量为5L，配制好后将2L台式液放入冰箱冷藏室，其余室温存放备用；

方法与步骤

2．实验过程：

（1）装好实验装置，向麦氏浴漕内加入台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定在38℃。

（2）标本制备：用立掌(或木槌)猛击兔后头延髓部或静脉注射空气，致其昏迷，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃幽门与十二指肠交界处，快速沿肠缘剪去肠系膜，在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入4℃左右的冷台氏液内。用20m1注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约2－3cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两端结扎，将一端结扎线连于浴槽，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中。适当调节传感器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。

方法与步骤

（3）开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。

（4）实验观察

①观察、记录38℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。

②观察、记录25℃台氏液中的肠段节律性收缩曲线。当出现明显变化后，立即用新鲜37℃台氏液冲洗，待恢复正常。

③同法加入45℃台氏液并记录曲线变化，同时观察肠段紧张度变化。当出现明显变化后，立即用新鲜37℃台氏液冲洗并待恢复。

由于以上台式液中未加入药物，可以回收使用。以下加入药物的台式液不可再用。

方法与步骤

④待麦氏浴槽内的台氏液的温度稳定在38℃后，加1:10000肾上腺素1～2滴于麦氏浴漕中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜38℃台氏液冲洗三次。

⑤同法加入1—2滴乙酰胆碱(1：10000)，观察并记录曲线变化。

⑥加入3滴阿脱品后立即加入与⑤同样剂量的乙酰胆碱，记录并观察曲线变化。

比较曲线有何不同

注意事项

1．标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开始实验。

2．加药前必须准备好更换用的38℃台氏液。

3．上述药物剂量只是参考，效果不明显可补加，每次加药出现效果后，必须立即更换浴槽内的台氏液并冲洗3次，待肠肌恢复正常活动后再观察下一项目。

4．浴槽内台氏液要保持一定高度。

参考曲线

思考题

1．本实验是否可用麻醉动物的肠段为什么

2．进行哺乳类动物离体组织器官实验时，需控制哪些条件

3．为什么加入各种药物会引起离体肠段活动的变化其机理是什么

4．加人阿托品后再加入乙酰胆碱，肠段活动受到抑制，为什么

5．根据实验结果说明平滑肌的生理特性。

创新与探索

1．设计实验，观察腹泻或止泻药物对离体肠段平滑肌的影响。

2．设计实验，分析哪些体液因素会对肠平滑肌产生影响。

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