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关于酶传感器工作原理图第1页,共15页,星期日,2025年,2月5日酶传感器工作原理图第2页,共15页,星期日,2025年,2月5日测定物质氧气过氧化氢氨气二氧化碳透气膜铂阴电极铂阳电极氢正离子敏感膜电流测量电位测量电极酶膜H正离子电位(电极)电流(场效应管)热光热敏电阻传感器光纤传感器酶传感器的类型第3页,共15页,星期日,2025年,2月5日酶的固定方法1、吸附法2、包埋法3、共价结合法4、交联法第4页,共15页,星期日,2025年,2月5日测定方法无机化学法:Folin-Wu法有机化学法:邻甲苯胺法酶法:葡萄糖氧化酶法血糖测定的常用方法应用实例第5页,共15页,星期日,2025年,2月5日方法类型原理用途及备注磷钼酸法定量G+Cu2+→Cu2O↓稳定、准确、但对(Folin-Wu)分光Cu2O+磷钼酸试剂→蓝色钼化合物葡萄糖无特异性,(430nm)受血中非糖还原物质的影响。邻甲苯胺法定量G+邻甲苯胺→蓝绿色的席弗(Schiff)碱较Folin-Wu法特异(630nm)但不及酶法。D-甘露糖能与邻甲苯胺反应,生成类似吸收光谱,造成正误差。(一)化学法第6页,共15页,星期日,2025年,2月5日酶法分析是指用酶作为工具定量测定某种物质含量的分析方法。定量分析的目标可以是酶的底物,辅酶,也可以是酶的激活剂或抑制剂。(二)酶法第7页,共15页,星期日,2025年,2月5日酶法分析的主要方法:
单酶反应定量法和偶联酶反应定量法单酶反应定量法:指用一种酶为工具酶定量测定某种物质的方法。偶联酶反应定量法:当单酶反应底物或产物反应底物或产物的物理化学手段无法区分时,还可以借助另一种酶作为指示酶,通过偶联反应进行定量分析。第8页,共15页,星期日,2025年,2月5日方法类型原理用途及备注己糖激酶定量G+ATP→G-6-P+ADP血清尿液脑脊液、(HK)法分光G-6-P+NADP+公认参考方法动态→GA-6-P+NADPH操作简便,特异终点(340nm)性和灵敏性均高推荐常规方法葡萄糖氧同上G+O2→GA+H2O2化酶(POD)H2O2+染料→有色染料偶联法(还原型)(氧化型)可制试纸片定量(Trinder)(4-氨基安替比林+酚半定量筛选试验→红色琨类化合物505nm)第9页,共15页,星期日,2025年,2月5日发展史第一阶段:经典葡萄糖酶电极的葡萄糖生物传感器采用过氧化氢电极作为基础电极,通过检测H2O2的产生量,进而检测血清中的葡萄糖含量。优点:葡萄糖浓度与产生的H2O2有当量
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