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病理组织切片技术.ppt

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透明

定义用某些化学试剂将组织中的脱水剂置换出来,以利于浸蜡和包埋,因组织块浸入这此试剂后常呈半透明状第31页,共81页,星期日,2025年,2月5日透明

目的透明是制片过程中很重要的环节。大多数脱水剂不能和包埋剂(如石蜡)混溶,而透明剂即可与脱水剂混溶,又能和包埋剂(如石蜡)混溶,能起到桥梁作用。第32页,共81页,星期日,2025年,2月5日常用的透明剂苯甲苯二甲苯(最常用的透明剂)三氯甲烷汽油香柏油冬青油松油醇第33页,共81页,星期日,2025年,2月5日常用的透明

方法将脱水后的组织块先用乙醇-二甲苯混合液处理或直接浸入透明剂中,置换透明剂2~3次即能达到目的。透明的时间的长短取决于标本的种类和组织块的厚薄,一般活检标本透明15~20min即可。第34页,共81页,星期日,2025年,2月5日四、浸蜡、包埋第35页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡

定义经过透明的组织块在溶化的石蜡中浸渍,使组织中的透明剂被完全置换出来的过程第36页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡的

目的使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。第37页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡的

种类石蜡明胶火棉胶树脂碳蜡又是包埋剂。既是透明剂,第38页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡的方法熔点:56~58℃温度:58~60℃(高于石蜡熔点2~3℃)第39页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡的

注意事项首先,应保证所用石蜡的质量,尽量不含杂质,否则易造成切片刀刀口受损或切片破碎、划痕增多。其次,浸蜡用的石蜡熔点应控制在55~58℃。蜡温过低,浸蜡不良;蜡温过高回烫伤组织,是组织收缩、变硬、切片时易脱片、卷片。再次,要控制好浸蜡时间。时间过短,蜡没有完全渗入组织、组织过软;时间过长,造成组织硬脆。两者均可造成切片困难。另外,应尽量去除沾在组织上的二甲苯,在浸蜡。第40页,共81页,星期日,2025年,2月5日浸蜡机第41页,共81页,星期日,2025年,2月5日包埋

定义将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中称蜡块,此过程称为包埋。第42页,共81页,星期日,2025年,2月5日包埋的目的有利于组织块的妥善保存有利于切成薄片可使组织具有一定硬度和韧性第43页,共81页,星期日,2025年,2月5日包埋方法石蜡包埋法(最常用)火棉胶包埋法碳蜡包埋法明胶包埋法第44页,共81页,星期日,2025年,2月5日包埋的注意事项包埋时,框要比组织块大,保证蜡块组织周围都有蜡边,对管、腔、壁组织要垂直包埋,而胃、肠、胆囊等组织,应将能看到的组织学各层面作为切面,其他组织则将切面朝下,小块多颗组织尽量放在一起并保持在同一水平面;包埋的蜡质不能含有杂质、纸絮、缝线等异物,最好是经过多次溶化、沉淀过的蜡。以利于切片。第45页,共81页,星期日,2025年,2月5日包埋机第46页,共81页,星期日,2025年,2月5日组织包埋盒第47页,共81页,星期日,2025年,2月5日四、切片第48页,共81页,星期日,2025年,2月5日常用的切片方法石蜡切片冰冻切片火棉胶切片第49页,共81页,星期日,2025年,2月5日切片前准备(1)修整蜡块可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分。否则易造成组织皱缩不平。第50页,共81页,星期日,2025年,2月5日(2)准备好切片用具

切片刀毛笔眼科镊子(弯)漂烘温控仪第51页,共81页,星期日,2025年,2月5日(3)安装蜡块将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上第52页,共81页,星期日,2025年,2月5日(4)安装切片刀将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度组织切片刀第53页,共81页,星期日,2025年,2月5日(5)切片的厚度切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm第54页,共81页,星期日,2025年,2月5日切片制作过程将切片刀安装于刀架上(调整好刀的角度,一般为20~30°左右)将蜡块固定在切片组织块夹具上调整组织块夹具的调节蜡旋,使蜡块切面与刀口平行。先粗修(30~50um

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