无菌生物负载取样位置.pdf

无菌生物负载取样位置

在无菌产品生产过程中，生物负载取样位置的确定直接影响检测结果的准

确性与产品安全性评估。根据《中华人民共和国药典》通则1105与1107，结

合GMP附录《无菌药品》第9章，以及ISO11737-1:2018标准要求，需建立系

统性取样策略。

法规依据

1.药典通则明确要求取样需覆盖产品暴露于环境风险的关键区域，包括但

不限于灭菌前产品的直接接触表面、密封系统接口、组装工序中暴露时间超过

30秒的部件。

2.GMP第223条强调生产设备与产品接触部位应作为必取点，如灌装针头、

胶塞振荡器料斗等存在微生物迁移风险的部位。

3.ISO标准第5.2.3款要求对灭菌柜冷点区域、层流操作台边缘15cm范围

内实施动态监测取样。

取样位置选择原则

高风险区域优先原则：根据FMEA分析结果，将产品无菌性影响因子≥8

的区域列为一级取样点。例如注射剂生产线上，胶塞料斗内壁的生物负载值通

常比传送带高3-4个对数单位，需在每批次生产后3分钟内完成表面接触法取

样。

产品接触面全覆盖原则：对于复杂器械如预充式注射器，需分别对玻璃套

筒内表面（使用φ55mm接触碟）、活塞橡胶件（棉签擦拭法25cm）及针头保

护帽（薄膜过滤法）实施差异化取样。

动态模拟验证原则：冻干机装载验证时，需在板层前中后三区各放置5个

TSB培养基瓶，模拟最大装载量下的微生物分布状态。

具体操作流程

1.准备工作：确认洁净室已运行≥30分钟达到动态级别，操作人员穿戴无

菌连体服并通过手套完整性测试。

2.取样工具选择：平面区域使用φ90mmTSA接触碟（暴露时间15分钟），

不规则表面采用浸有中和剂的涤纶拭子（擦拭面积25cm，呈弓字形路径）。

3.取样实施：

灌装区：每半小时对分装针头下方15cm处放置沉降菌碟

灭菌柜：在柜体排水口附近放置生物指示剂支架

第1页共3页

包装线：随机抽取5个初包装袋内表面进行棉签涂抹

4.样本处理：接触碟立即转移至30-35℃培养箱，拭子样本需在1小时内加

入10ml洗脱液涡旋震荡45秒。

特殊产品取样要点

1.冻干粉针剂：在压塞后半加塞状态下，使用无菌镊子将接触碟伸入西林

瓶内1/2处进行表面取样。

2.大输液产品：对膜过滤器的进出口端各取25cm面积，特别注意滤壳与

滤芯接合部位的环形区域。

3.植入器械：在洁净工作台内拆解产品，对关节部位的润滑剂残留实施棉

签擦拭并做微粒分析。

数据采集标准

每个取样点需记录环境监控编号（如EM-0123-01）、取样时间精确至分钟、

操作人员工号及所用培养基批号。接触碟培养结果按CFU/碟报告，擦拭法结果

换算为CFU/25cm。对于R2A培养基的培养温度应控制在22.5±2.5℃，培养

时间延长至120小时以捕获环境微生物。

风险控制措施

1.建立警戒限与行动限：将历史数据P50P50值设为警戒线，值设为警戒线，P95值作为行动

阈值。例如A级区接触碟数据超过3CFU/碟立即启动偏差调查。

2.趋势分析工具：运用Minitab软件进行CPK计算，当过程能力指数1.33

时，需重新评估取样点设置合理性。

3.纠正验证：对超限取样点实施三次连续验证取样，确认整改措施有效性

后方可恢复生产。

设备验证要求

接触碟需每季度进行促生长试验，棉签洗脱效率应≥80%。采样泵流量需

用校准过的流量计验证，误差控制在±5%以内。对于隔离器内部的取样装置，

需在验证时模拟实际操作姿态进行粒子挑战试验。

人员资质管理

操作人员每年接受不少于8学时的专项培训，重点考核更衣确认合格率、

取样手法标准化程度。新员工需在导师监督下完成3次模拟取样，其操作录像

需经质量部门评估确认。

文件记录规范

第2页共3页

每份取样记录应包含环境温湿度、压差动态数据、取样点示意图（标注于

车间平面图副本）。电子数据需遵循ALC