检测含乳糜微粒血清的低密度脂蛋白胆固醇的处理规范.docxVIP

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检测血清低密度脂蛋白胆固醇乳糜标本处理规范

1范围

本文件规定了检测血清低密度脂蛋白胆固醇乳糜标本处理的生物安全要求、仪器设备、标本采集、处理方法和结果应用。

本文件适用于检测血清低密度脂蛋白胆固醇乳糜标本的处理。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求WS/T463-2015静脉血液采集指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1乳糜微粒chylomicron;CM

CM主要来源于食物脂肪，颗粒最大，是食物来源的外源性脂质。进入末梢组织的载体，主要功能是转运外源性甘油三酯。

3.2乳糜标本

其血浆或血清呈乳白色浑浊状，主要是由于体内脂类代谢紊乱而导致乳糜微粒在血液中含量高出正常水平。

4缩略语

低密度脂蛋白胆固醇lowdensitylipoproteincholesterol；LDL-C高密度脂蛋白胆固醇highdensitylipoproteincholesterol；HDL-C

极低密度脂蛋白胆固醇verylowdensitylipoproteincholesterol；VLDL-C

总胆固醇totalcholesterol；TC甘油三酯（triglyceride）；TG

血清信息指数（LipemiaIcterusHemolysis）LIH

5基本要求

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标本采集、处理及检测过程所涉及的实验操作应该符合GB19489的规定。

6检测过程质控

6.1乳糜标本测量存在的问题

6.1.1标本签收后直接上流水线离心、去盖、检测并加盖后自动放入冰箱，导致乳糜标本一般不易发现。

6.1.2标本检测血脂四项时，检验者对因严重乳糜原因而导致的假性正常LDL-C不去专门审核进而纠正。

6.1.3在血脂检测项目中，对仅包含TC和LDL-C两个项目的样本进行分析时，若未对样本是否呈现乳糜状态进行专项核实，则极有可能导致假阴性结果的产生，进而误导原始检测结果的准确性。

6.1.4发现乳糜标本未与临床科室确认患者是否空腹采血（建议空腹6-8小时），排除饮食干扰。

6.2乳糜标本质控

6.2.1检测前：在签收标本的过程中，若遇到已经凝固并呈现乳糜状态的样本，特别需要核对是否进行血脂检测，尤其是LDL-C的检测。

6.2.2检测后：在审核结果环节，审核血脂检测的标本时，发现TG检测值异常高的标本，考虑是否存在LDL-C值偏低的情况；审核单测TC、LDL-C俩项的标本时，发现TC、LDL-C检测值正常但TC却偏高

的标本，考虑是否存在LDL-C值偏低的情况。

7标本采集

7.1采集要求

应符合WS/T463-2015的规定。

7.2乳糜标本判断

出现以下现象时，可判断为乳糜标本。

7.2.1肉眼可见的外观异常分级：

0级（透明）：无乳糜微粒，血清清澈。

1级（轻微浑浊)：轻度乳糜微粒悬浮，可见文字透过（如报纸文字)。2级（中度浑浊）：明显浑浊，文字模糊不可见。

3级（重度浑浊)：乳糜微粒富集，呈牛奶状。参考标准：

CLSI指南(H21-A5)：推荐目测法作为快速筛查工具，但需结合实验室检测确认。

7.2.2生化仪检测显示：LIH：+++++++++++++++

8处理方法

8.1超速离心

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10000×g30分钟(4°C)离心后用移液枪穿过乳糜层吸取透明血清100μL或200μL上生化分析仪检测LDL-C值。

参考标准：

NCEPATPIII指南：建议对乳糜血标本进行短时高速离心（10,000×g,30分钟)以去除乳糜微粒。

8.2琼脂糖凝胶电泳

血清经琼脂糖凝胶电泳空气干燥后，仪器自动将胆固醇基质试剂（含胆固醇酯酶、胆固醇脱氢酶、黄递酶、NAD+、NBT等）均匀铺在凝胶表面，孵育后取出凝胶片，即可见清晰的蓝色条带，从阳极起依次为HDL-C、VLDL-C和LDL-C。凝胶片用10%冰醋酸固定5min后，再用水振荡清洗5min，然后将凝胶置仪器上烤干（54℃,7min）。570nm波长下自动扫描，即可确定各自百分含量。同时将血清总胆固醇（totalcholesterol，TC值输入，则可求得LDL-C值）。

8.3标本稀释

8.3.1取离心后的乳糜标本血清100μL，置于无菌干燥试管，应用0.9%生理盐水100μL进行1:2稀释充分混匀，将稀释后的血清吸取200μL上生化分析