酶类药物及其生产工艺.pptVIP

常见的酶类药物及治疗作用常见酶类药物1、L-天门冬酰胺酶工艺路线菌种培养大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉培养基;种子培养16％玉米浆，接种量1～1.5％，37℃，通气搅拌培养4～8h;发酵罐培养玉米浆培养基，接种量8％，37℃通气搅拌培养6～8h，离心分离发酵液，得菌体，加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干成菌体干粉;L-天门冬酰胺酶工艺说明提取、沉淀、热处理每千克菌体干粉加入0.01mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37℃搅拌1.5h，30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4，压滤，滤液加入2倍体积的丙酮，放置3～4h过滤，收集沉淀，自然风干，得干粗酶。取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节pH8.8搅拌1.5h离心，上清液60℃30min热处理。上清液加2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶沉淀，0.01mol/L，pH8磷酸缓冲液溶解，离心得上清酶溶液。精制、冻干调节pH8.8离心弃去沉淀，清液再调pH7.7加入50％聚乙二醇，浓度达到16％。2～5℃放置4～5天，离心得沉淀。蒸馏水溶解加4倍量的丙酮沉淀，同法反复1次，pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液溶解，50％聚乙二醇处理1次，即得无热原的L一天门冬酸胺酶。溶于0.8mol/L磷酸缓冲液，在无菌条件下用6号垂熔漏斗过滤，分装，冷冻干燥制得注射用L一天门冬酸胺酶成品，每I支1万或2万单位。细胞色素C生产工艺临床上主要用于组织缺氧的急救和辅助治疗药物，适用于治疗脑、心肌缺氧和其它因缺氧引起的一切症状。工艺过程工艺过程①绞碎、提取、压滤取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌健等，绞肉机中绞碎。称取心肌碎肉，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀，用硫酸调pH4左右，常温搅拌提取压滤，滤液用氨水调节pH6.2，离心得提取液。心渣再加等量蒸馏水同上法重复提取1次，合并两次提取液。②中和、吸附、洗脱提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋白，吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石，搅拌吸附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞色素C的人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤，然后装柱，用25％硫酸氨溶液洗脱，得洗脱液。