红细胞血型及相关检测.ppt

（五）方法学评价试管法：常用，广泛，较玻片法灵敏，结果准确，反应时间短，结果不能保存，人为因素大玻片法：操作简单、无需特殊仪器，适用于血型普查；灵敏度差，反应时间长，不能用于反定型，结果不能保存，人为因素影响大，易发生血液污染微柱凝胶血型定型检测卡法：特异性强、灵敏度高，结果准确，保持时间长，标本和试剂用量少，操作可以标准化、自动化，减少了医源性污染，但需要专门离心设备和试剂卡，成本较高第17页，共63页，星期日，2025年，2月5日输血治疗的首要步骤组织器官移植新生儿溶血病ABO正反定型的临床意义第18页，共63页，星期日，2025年，2月5日ABO正反定型不符分析基本程序首先重复试验重新采集献血者与受血者血液标本查询受血者既往病史及输血史和用药史等多次洗涤标本红细胞应用抗-AB、抗-A1、抗-H检测红细胞第19页，共63页，星期日，2025年，2月5日错加试剂或标本技术和操作受血者红细胞或血清ABO正反定型不一致的原因试剂失效或污染细胞与血清间比例不适当溶血现象未能识别漏加试剂结果记录或判断错误血清异常红细胞致敏近期输血疾病导致抗原减弱抗体减弱不规则抗体年龄近期进行大量血浆置换治疗第20页，共63页，星期日，2025年，2月5日RhD定型及其常见问题1.Rh定型RhD定型，试管法最经典，多使用微柱凝胶卡2.RhD阴性确认IgM抗-D阴性三个厂家IgG抗-D进行确认抗人球蛋白法进行确认三种IgG抗-D试剂均为阴性，报RhD阴性一种或一种以上IgG抗-D试剂为阳性，报弱D第21页，共63页，星期日，2025年，2月5日概念：检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分，是输血前确保受血者输血安全必不可少的试验包括：主侧配血和次侧配血主侧是受血者血清与供血者红细胞相配的一侧次侧是受血者红细胞与供血者血清相配的一侧。三、交叉配血试验第22页，共63页，星期日，2025年，2月5日交叉配血的主次侧第23页，共63页，星期日，2025年，2月5日（一）盐水介质交叉配血试验本质凝集反应，直接凝集试验检测IgM类抗体方法：试管法ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血，表示无输血禁忌，可以输血第24页，共63页，星期日，2025年，2月5日盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心看结果阳性阴性第25页，共63页，星期日，2025年，2月5日（二）抗球蛋白介质交叉配血试验抗人球蛋白试验：又称Coombs试验，是一种检查不完全抗体的敏感方法分类：直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验第26页，共63页，星期日，2025年，2月5日抗球蛋白试验原理Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。直接试验：是检查被检红细胞上有无不完全抗体间接试验：是检查血清中游离的不完全抗体第27页，共63页，星期日，2025年，2月5日直接Coombs试验抗人免疫球蛋白自身抗体第28页，共63页，星期日，2025年，2月5日间接Coombs试验抗人免疫球蛋白同种异型抗体第29页，共63页，星期日，2025年，2月5日2不完全抗体可以结合在红细胞表面,但是不能和两个红细胞同时结合（致敏）。3加入抗人球蛋白1红细胞彼此之间有一定的间距4抗人球蛋白可以同时和两个不完全抗体的FC段结合，从而把红细胞连接在一起抗人球蛋白交叉配血法示意图第30页，共63页，星期日，2025年，2月5日抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37℃?37℃水浴30分钟三洗第31页，共63页，星期日，2025年，2月5日抗球蛋白方法配血方法加抗球蛋白离心看结果阳性阴性抗球蛋白试剂上海市血液中心血第32页，共63页，星期日，2025年，2月5日结果判读直接抗球蛋白试验阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集，判定为阳性阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管不凝集，需要做阴性确认后判定结果（无凝集的被检管中加入IgG抗-D致敏红细胞后离心，出现凝集判阴性，否则重新试验阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，结果不可信不发报告，分析原因重做第33页，共63页，星期日，2025年，2月5日间接抗球蛋白试验阳性对照管呈现凝集反应，阴性对照管未呈现凝集反应，被检管呈现凝集反应为阳性结果，被检者血清内含有抗体，如果自身对照无凝集，同种抗体；如果被检者结果阴性，被检者血清中未被查出意外抗体。阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝集，实验失败。结果判读第34页，共63页，星期日，