重组DNA技术基础.pptVIP

RNA的结构StructureofRNARNA的种类、分布、功能mRNArRNAtRNA一、mRNA的结构与功能外显子(exon)内含子(intron)hnRNAmRNA01真核细胞mRNA结构特点025′末端有甲基化鸟苷帽子结构：m7GpppNm-033′末端有多聚腺苷酸尾巴：PolyA。帽子结构促进mRNA由胞核向胞质的转位维持mRNA的稳定性翻译起始的调控01帽子结构和多聚A尾的功能02*mRNA的功能把DNA的碱基序列翻译成蛋白质的氨基酸顺序。DNAmRNA蛋白转录翻译原核细胞细胞质细胞核DNA内含子外显子转录转录后剪接转运mRNAhnRNA翻译蛋白真核细胞tRNA的一级结构特点含10~20%稀有碱基，如DHU3′末端为—CCA-OH5′末端大多数为G具有T?C转运RNA的结构与功能12N,N-二甲基鸟嘌呤N6-异戊烯腺嘌呤双氢尿嘧啶（DHU）4-巯尿嘧啶稀有碱基0102030405*tRNA的二级结构——三叶草形氨基酸臂DHU环反密码环额外环TΨC环氨基酸臂额外环tRNA的功能活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。tRNA的三级结构——倒L形rRNA的功能参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。rRNA的结构与功能rRNA的结构原核生物5SrRNA23SrRNA16SrRNA真核生物5SrRNA28SrRNA8SrRNA18SrRNArRNA的种类S（沉降系数）：单位时间内的沉降速度核酸的理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid核酸的溶解度在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大。RNA+蛋白质→核糖核蛋白（RNP）：核酸是极性分子，微溶于水，不溶于乙醇或异丙醇。在1mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大。DNA+蛋白质→脱氧核糖核蛋白（DNP）：一、核酸的一般理化性质2.酸碱性核酸属于两性电解质，但因为磷酸的酸性较强，因此总体呈现较强的酸性。具有较低的等电点。当溶液的pH?4时，呈多负离子状态，容易与金属离子结合形成盐。2.碱基嘌呤(purine)嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶(cytosine,C)尿嘧啶(uracil,U)胸腺嘧啶(thymine,T)腺嘌呤(adenine,A)鸟嘌呤(guanine,G)1碱基——核糖（脱氧核糖）连接方式：C——N糖苷键碱基（9/1位）——戊糖（1，位）核苷：AR,GR,UR,CR脱氧核苷：dAR,dGR,dTR,dCR核苷(ribonucleoside)1′01核苷酸：02AMP,GMP,UMP,CMP03脱氧核苷酸：04dAMP,dGMP,dTMP,dCMP05核苷酸(ribonucleotide)06核苷（脱氧核苷）——磷酸07磷酸酯键体内重要的游离核苷酸及其衍生物cAMPAMP５.核苷酸的连接5′端3′端３，－５，磷酸二酯键CGA二、核酸的一级结构定义：核酸中核苷酸的排列顺序（碱基序列）。5′端3′端CGA书写方法AGP5?PTPGPCPTPOH3?5?pApCpTpGpCpT-OH3?5?ACTGCT3?竖式横式简化式DNA的空间结构一、DNA的二级结构（一）双螺旋结构DNA双螺旋结构模型要点（Watson,Crick,1953）两条DNA单链分子反向平行环绕，右手螺旋走向，表面大沟与小沟相间。螺旋直径为2nm，主链：戊糖－磷酸骨架位于外侧侧链：碱基对位于内侧碱基平面垂直于螺旋轴碱基距：0.34nm；螺距：3.4nm；周长：10对碱基。碱基形成氢键配对，配对形式为：A=T;G?C）。碱基互补配对TACG氢键维持横向稳定性，1碱基堆积力维持纵向稳定性。2介质中阳离子可以有效地屏蔽磷酸基之间的静电斥力3稳定因素：DNA双螺旋结构的多样性Ｚ型B型A型碱基顺序颠倒重复而具有2倍对称的DNA段