薄层色谱鉴别介绍.ppt

色谱用滤纸纤维的方向会影响组分的分离，故每次展开时,滤纸的纤维方向应一致.商品滤纸有厚纸、薄纸、慢速、快速、中速等不同类型可供选择.第30页，共56页，星期日，2025年，2月5日D2薄层板 有资料表明，60%以上的薄层分离用硅胶作为吸附剂，其次为纤维素、氧化铝、聚酰胺、硅藻土等。固定相第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日硅胶 硅胶是一种弱酸性的多孔性无定形吸附剂。 硅胶表面有很多硅醇基(－Si－OH)，通过硅原子上的-OH基团与极性化合物或不饱和化合物形成氢键而表现出吸附性能。硅醇基的数目越大，则吸附能力增强。 硅胶也能吸附水分而成为水合硅醇基。 第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日氧化铝 氧化铝由氢氧化铝高温脱水而成。按制备方法不同，氧化铝可分为三种：碱性氧化铝：pH=9～10,可分离合成染料，生物碱等酸性氧化铝：pH=4～5，适应于酸性物质的分离中性氧化铝：pH=7～7.5，适于分离醛酮，以及对酸碱不稳定的脂和内酯等化合物 氧化铝的活度与其含水量有关，含水量大，则吸附能力小。活性级别ⅠⅡⅢⅣⅤ含水量%-361015第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日纤维素 纤维素分子中带有许多羟基，亲水性强，分离原理与纸色谱相似，但分离效果和分离速度均比纸色谱佳，可以代替纸色谱.第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日普通纤维素：天然纤维素、高纯度纤维素、微晶纤维素。乙酰化纤维素：用乙酸将纤维素结构上的羟基酯化而成，适用于反相色谱。离子交换纤维素：纤维素经化学反应，使分子中一部分羟基上的氢被阳离子或阴离子交换基取代而成，具有离子交换树脂的性质。纤维素的种类有：第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日聚酰胺聚酰胺是由酰胺聚合而成的高分子聚合物。薄层色谱中常用的聚己内酰胺，结构如下： 酰胺中心的酰胺基可与酚类、酸类、硝基类等化合物形成氢键而对这些物质产生吸附作用。应用：蛋白质、肽、多糖、核苷酸等的分离。[-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-C-N-]nHO第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日葡聚糖 葡聚糖是一种由葡萄糖残基构成的多糖物质。葡聚糖凝胶是由一定分子量的葡聚糖悬浮于有机相中，加入交联剂交联聚合而成。 在葡聚糖分子上引入有机基团，则可成为亲脂性凝胶。 在葡聚糖凝胶上引入羧甲基、磺乙基等，则制成具有离子交换性质的葡聚糖凝胶离子交换剂。 应用：蛋白质、肽、多糖、核苷酸等的分离第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日薄层板的种类载板材料：玻璃片、铝箔、塑料片等薄层板类型：硬板：在固定相中加入粘合剂（煅石膏、淀粉）;软板：不加粘合剂;烧结玻璃板：将玻璃粉与硅胶、氧化铝等吸附剂按一定比例混合后，以丙酮、乙醇或水等溶剂调成匀浆，涂成薄层，经高温烧结而成。第38页，共56页，星期日，2025年，2月5日吸附剂及预制板包装上的符号及含义G——加入一定的煅石膏作粘合剂H——不加粘合剂，供制各种软板用F254——加入对254nm波长能发荧光的物质F254s——加入抗酸性荧光指示剂第39页，共56页，星期日，2025年，2月5日第40页，共56页，星期日，2025年，2月5日关于薄层色谱鉴别介绍第1页，共56页，星期日，2025年，2月5日概念薄层色谱法(TLC)将固定相(如硅胶)薄薄地均匀涂敷在底板(或棒)上，试样点在薄层一端，在展开罐内展开，由于各组分在薄层上的移动距离不同，形成互相分离的斑点，测定各斑点的位置及其密度就可以完成对试样的定性、定量分析的色谱法。第2页，共56页，星期日，2025年，2月5日薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。基本原理第3页，共56页，星期日，2025年，2月5日在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物。第4页，共56页，星期日，2025年，2月5日比移值组分二组分