遗传病的诊断与治疗lsy.pptVIP

第三代遗传标志：单核苷酸多态性（SNP）：分子诊断的特点针对直接病因诊断特异性强，灵敏度高适应性强，诊断范围广目的基因是否处于活化状态均可，无组织和发育特异性。在感染性疾病的基因诊断中，可检测正在生长的病原体或潜伏病原体。分子诊断的材料可以是任何有核细胞，包括：外周血白细胞、口腔粘膜细胞活检标本、石腊包埋的组织块沉淀细胞（唾液、痰液、尿液）羊水细胞、绒毛细胞、进入母体循环的胎儿细胞(应用PCR，样本可微量化到一个细胞)分子诊断的基本技术限制性片段长度多态性分析（RFLP）核酸杂交(Southern)聚合酶链反应(PCR)DNA测序基因芯片技术其它常用的技术PCR-RFLP（2）PCR-ASOPCR-SSCPSouthern印迹杂交原理基因组DNA01DNA片段02杂交03结果分析04酶切05探针06Southern流程07Southernblottingα1probeSouthern诊断示例：?-地中海贫血α2α2BamHIkbBamHIkbSouthernblotting14kbSouthern诊断结果分析αα/αααα/α-αα/--α-/----/--正常缺1缺2缺3缺410kbRFLP:RestrictionFragmentLengthPolymorphism限制性片段长度多态性RFLP原理Southern-RFLPMstII识别序列单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。MstII1.2kbCCTGAGGCCTGTGGRFLP诊断:镰状细胞贫血症probekbx2kbSouthern-RFLP结果分析kbkbβΑ/βΑβΑ/βSβS/βS正常镰状镰状贫血PCR原理KaryMullispolymerasedNTPs镰状细胞贫血(HbS)：第5～7位密码子?A?A?A?S?S?SMstⅡ:CCTNAGG1.2Kb0.2Kb1.40Kb1.20Kb0.20Kb?A:CCTGAGGAG?S:CCTGTGGAGPCR-RFLPASO:allele-specificoligonucleotide,等位特异性的寡核酸探针PCR-ASOPCR-ASO添加标题ASO点杂交检测基因突变举例添加标题正常探针：5’－AAGGCTTAGCTTAGCTTTGGACC突变探针：5’－AAGGCTTAGGTTAGCTTTGGACC添加标题突变探针添加标题正常探针添加标题正常人病人SSCP:SingleStrandConformationPolymorphism,单链构象多态性PCR-SSCP原理PCR-SSCP示例DNA芯片01DNA测序02FISH03FISH原理FISH应用示例18号染色体21号染色体X染色体Y染色体13号染色体FISH应用示例利用FISH技术检测染色体易位利用FISH技术检测21-三体(R)和13(G)染色体分子诊断的限制因素分子诊断方法具有无限广阔的应用前景，随着技术的不断进步和诊断成本的不断降低，临床应用越来越广泛。目前限制分子诊断应用的主要因素有：大部分遗传相关性疾病的致病基因还未明确，特别是多基因疾病和具有遗传异质性的疾病；成本较高、周期较长；遗传学和分子生物学知识还未得到广泛的普及。第18章遗传病的治疗本章主要内容：一般原则，传统方法，基因治疗。医学遗传学MedicalGenetics医学遗传学MedicalGenetics医学遗传学MedicalGenetics医学遗传学MedicalGenetics研究发现，在绝大多数情况下，DNA甲基化所提供的是关闭基因表达的信息，也称沉默信息。如果把基因的表达与关闭比作门的开与合，那么DNA甲基化就好比一把锁，彻底而长久地关闭基因的表达。那么，小小的甲基