霍乱实验室检测技术.pptVIP

霍乱的生物学性状抗原结构、血清群#2022生长与培养特性好氧同时兼性厌氧，最适生长温度37℃钠离子可刺激生长耐碱不耐酸初次分离时常用碱性蛋白胨水(pH8.8-9.0)增菌培养，霍乱弧菌经6～8h增菌后可在液体表面大量繁殖，形成菌膜霍乱的生物学性状霍乱的生物学性状添加标题两个生物型的霍乱弧菌都能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖添加标题产酸不产气添加标题迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖添加标题氧化酶试验弧菌属细菌大多为阳性添加标题粘丝实验弧菌属细菌大多为阳性生化反应特性对外界的抵抗力在河、井、海水中可存活13周以上食物和海产品上存活7天左右对低温和碱耐受力强（在食品上的弧菌于冰箱保存（0~5度）比室温存活时间长）对热、干燥、太阳直射敏感对含氯制剂、碘制剂敏感对酸和强氧化剂极敏感煮沸100度1~2min即可被杀死药物敏感性细菌带有可传递的耐药质粒近年产生多重耐药株（丁胺卡那霉素、强力霉素、复方新诺明）诺氟沙星和环丙沙星对霍乱弧菌保持较高的敏感性霍乱的生物学性状霍乱的生物学性状霍乱的致病性#2022样本的采集水样便采1~3ml，成形便取指甲大小量肛拭子：生理盐水浸湿采便管由肛门插入直肠内3~5cm处旋转取出呕吐物采1~3ml标本和碱胨水比例为1：5腹泻患者样本采集采集相对静止表层水（30cm内）500ml其他液体标本采集500ml2~3小时内送检水样及液体标本采集2~3支无菌棉签涂抹3~5只以上水生动物表面、腮部及泄殖腔2~3支无菌棉签涂抹食品或物品表面（地沟口，下水管口，水池壁涂抹，餐盘内外侧）直接放入10ml碱胨水送检涂抹样本采集典型的米泔水样便检验操作程序01水样便：取一滴在玻片上，盖盖玻片，暗视野显微镜直接观察成形便：取适量在生理盐水中研磨，盖盖玻片，镜下观察高度可疑样本：取增菌的碱胨水在玻片上，盖盖玻片，镜下观察镜下有穿梭样运动为动力试验阳性动力试验02取O1群、O139群霍乱弧菌诊断血清，取适量标本在其中研磨穿梭样运动消失，菌体凝集成块为动力抑制试验阳性动力抑制试验检验操作程序分离培养基分两类选择性强的培养基四号琼脂、TCBS、庆大培养基选择性弱的培养基碱性琼脂和碱性胆盐琼脂增菌及分离培养碱性蛋白胨水pH8.8-9.0注意标本和胨水的比例要适当霍乱弧菌在庆大培养基上菌落形态。(菌落呈现无色、圆形半透明、湿润、扁平或稍突起、边缘整齐，由于亚碲酸钾的作用，菌落中央常呈灰色或灰黑色）Ｏ１３９型霍乱弧菌在４号平板和ＴＣＢＳ上的菌落形态检验操作程序庆大平皿划线培养３７℃18-24h每皿挑取9-10个可疑菌落血清凝集试验二次增菌３７℃6-8h01向医院属地CDC报告医学观察病例悬滴动力试验（+），动力抑制试验（+）有明确流行病学史，动力试验（+），动力抑制试验（+）症状典型但服药患者便02病人粪便标本增菌３７℃6-8h霍乱分群诊断（单克隆抗体）Ｏ１群Ｏ１３９群检验操作程序菌株的初步鉴定血清凝集试验复核及鉴定血清凝集试验革兰氏染色氧化酶试验粘丝试验动力试验检验操作程序菌株的初步鉴定血清凝集试验挑取可疑菌落与O1群、O139群霍乱弧菌诊断血清做玻片凝集试验，很快出现均匀沙粒样凝集颗粒为阳性（一般不超过10s）注意：菌液浑浊，似凝非凝不能判定为阳性同时做生理盐水对照在1min内不出现凝集为阴性结果可疑时需要做PCR鉴定霍乱弧菌实验室检测技术北京市海淀区疾病预防控制中心霍乱的流行情况霍乱的生物学性状样本的采集检验操作程序荧光定量PCR方法检测O1群、O139群霍乱弧菌及霍乱毒素提纲由O1群、O139群霍乱弧菌引起的霍乱以发病急、传播快、波及范围广、能引起大流行为特征，被世界卫生组织列为国境卫生检疫传染病，也是我国传染病防治法中规定强制管理的甲类传染病。O1群霍乱弧菌的流行情况添加标题1817年~1923年发生六次霍乱的世界大流行添加标题1961年开始了第七次霍乱的世界大流行添加标题均由O1群霍乱弧菌古典生物型引起添加标题均由O1群霍乱弧菌埃尔托生物型引起（1905年发现）添加标题1820年古典生物型引起的霍乱首次传到我国添加标题1961年埃尔托生物型霍乱首次传到我国O1群和O139群霍乱弧菌与其他霍乱弧菌的最大区别是能产生相同的霍乱毒素O139群霍乱弧菌的流行情况1992年印度马德拉斯发生O139霍乱并迅速传播1993年6月我国新疆发现O139霍乱流行。1994年我市发现O1