高效液相色谱检测器.ppt

原理：当被分离的电活性物质流经电极表面时，由于溶液与电极间有电势差，电活性物质就要得到或失去电子，被还原或氧化，因此，溶液和电极间发生电荷转移，形成电流，该电流符合法拉第定律，即电流大小与待测物浓度成正比。记录电流随时间的变化，得到电泳谱图。第30页，共42页，星期日，2025年，2月5日关于高效液相色谱检测器第1页，共42页，星期日，2025年，2月5日检测器是高效液相色谱仪的核心部件，他负责把从色谱柱分离出来的各组分快速、准确的检测出来，实现定性、定量分析。第2页，共42页，星期日，2025年，2月5日检测器的分类1、紫外可见吸收检测器(UV)2、光电二极管阵列检测器(PDA)3、荧光检测器(FD)4、示差折光检测器(RID)5、电化学检测器(ED)6、化学发光检测器(CD)7、蒸发光散射检测器(ELSD)第3页，共42页，星期日，2025年，2月5日紫外可见吸收检测器(ultraviolet－visibledetector，UV)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。属于选择性检测器。1、特点：灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，波长可选，对流动相的流速和温度变化不敏感，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达10-9g/ml以下，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与多种检测器串联使用。工作原理与结构同一般分光光度计相似，也就是装有流通池的紫外可见分光光度计。第4页，共42页，星期日，2025年，2月5日2、结构与原理：紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm～800nm)。它有两个流通池，一个参比池，一个测量池。光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，即无信号输出。当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，即有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。第5页，共42页，星期日，2025年，2月5日可变波长紫外检测器固定波长紫外检测器结构图第6页，共42页，星期日，2025年，2月5日紫外/可见光检测器的光路系统，由氘灯提供190nm～600nm宽带光谱，光线径直射到全息凹面光栅上，衍射的单色光射到半透射反光镜，被分成两束光线，一束经流通池后照射到测量光电池上，另一束经参比池照射到参比光电池上，光电池把光能量转换成微小电流信号，光栅由一台微机控制的步进电机精确地驱动以改变波长。如图所示：D氘灯光门波长调节杆凹面光栅半透镜流通池光电池（测量）光电池（参比）暗盒第7页，共42页，星期日，2025年，2月5日单色器光源步进电机半透反光镜检测池参比池光/电转换前置放大器A/DCPU时钟并行口讯号输出(积分/记录)键盘显示屏直流电源变压器交流电源冷却风机《紫外/可见光检测器系统原理图》第8页，共42页，星期日，2025年，2月5日3、局限：对紫外吸收差的化合物如不含不饱和键的烃类等灵敏度很低。流动相的选择受到一定限制，紫外吸收大的溶剂不能做流动相。每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，流动相的截止波长不能大于紫外吸收检测器的工作波长。第9页，共42页，星期日，2025年，2月5日光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDA)光电二极管阵列检测器是紫外检测器的重要进展，也称快速扫描紫外检测器，在液相色谱分析中得到大量的使用，被认为是液相色谱最有发展、最好的检测器。1、特点：灵敏度比紫外检测器高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度的波动不灵敏，适用于梯度洗脱及制备色谱。第10页，共42页，星期日，2025年，2月5日2、原理与结构：检测器的接收是由一组光电二极管（数量由35～1024个不等）接收，并转换为电信号。光电二极管的排列（数字分辨）和狭缝宽度（光学分析）决定了检测器的全波长分析能力。还能获得色谱分离组分的三维光谱色谱图。第11页，共42页，星期日，2025年，2月5日《二极管阵列检测器光路示意图》氘灯消色差透镜斩光器流通池载液全息光栅二极管阵列检测器