生物化学肝功能.ppt

测定方法:（一）测定水解释放的无机磷鲍氏（Bodansky）法（二）测定底物水解后的羟基化合物1.羟基化合物需与显色剂作用后比色测定金氏（King）法2.羟基化合物在碱性条件下直接显色测定对硝基酚磷酸盐（p-nitrophenylphosphate,4-NPP）法第62页，共93页，星期日，2025年，2月5日金氏法测定血清碱性磷酸酶ALP在碱性条件催化磷酸苯二钠水解，释放出酚和磷酸，酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化形成红色的醌类化合物，根据红色的深浅与校准酚比较，确定ALP的活性。原理:第63页，共93页，星期日，2025年，2月5日参考范围：单位定义：灵敏度较高，显色稳定，不需去蛋白，操作简单、快速准确度和精密度都较低,受胆红素和溶血的干扰方法评价：100ml血清在37℃与底物作用15min，产生1mg酚为1个金氏单位成人3～13金氏单位，儿童5～28金氏单位第64页，共93页，星期日，2025年，2月5日速率法测定血清碱性磷酸酶原理:以对-硝基苯酚磷酸钠（4-NPP）为底物，AMP或二乙醇胺（DEA）为磷酸酰基的受体。在碱性条件下，ALP催化4-NPP水解释放出磷酸基团，生成游离对-硝基酚（p-nitrophenol,4-NP），4-NP在碱性溶液中转变成醌式结构，呈现较深的黄色。根据405nm处吸光度增加的速率（△A/min）推算出清ALP活性单位。第65页，共93页，星期日，2025年，2月5日计算：参考范围：40～160U/L（37℃）灵敏度高、线性范围宽（500U/L以上）和精密度高方法评价：第66页，共93页，星期日，2025年，2月5日3.肝细胞性黄疸（肝源性黄疸）由于肝细胞病变，肝功能减退，使肝脏对胆红素的摄取、转化和排泄作用发生障碍。一方面肝脏不能将未结合胆红素转化成结合胆红素，使血中未结合胆红素增加；另一方面，病变区压迫毛细胆管，使结合胆红素返流入血，血中结合胆红素也增加。第30页，共93页，星期日，2025年，2月5日2.黄疸的生化检查（1）血清总胆红素和结合胆红素的测定（2）尿三胆的测定:尿胆红素、尿胆素原、尿胆素（3）胆红素葡萄糖醛酸转移酶的诱导试验黄疸类型的鉴别肝细胞损害程度和预后判断第31页，共93页，星期日，2025年，2月5日（二）黄疸的生化诊断1.血清总胆红素和结合胆红素的测定用于黄疸类型的鉴别，肝细胞损害程度和预后判断。2.尿三胆的测定尿胆红素、尿胆素原、尿胆素合称为尿三胆。由于尿胆素是由尿胆素原遇空气氧化而来，故临床上一般只测定尿胆红素和尿胆素原。第32页，共93页，星期日，2025年，2月5日3.胆红素葡萄糖醛酸转移酶的诱导试验（1）糖皮质激素的诱导试验：糖皮质激素能诱导肝细胞内尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的合成，促进未结合胆红素的转化与排泄，使血清胆红素迅速下降。（2）苯巴比妥试验：苯巴比妥类药物能诱导肝细胞内Y蛋白和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的合成，苯巴比妥类药物可用于核黄疸的治疗。第33页，共93页，星期日，2025年，2月5日二、肝硬化的生化是由于多种损伤因素长期或反复作用于肝，使肝细胞弥漫性变性、坏死，以及肝结缔组织弥漫性增生，导致肝广泛的纤维化和结节的形成称为肝硬化。第34页，共93页，星期日，2025年，2月5日（一）肝硬化病因的分类1.确定的病因：①乙型、丙型病毒性肝炎；②乙醇中毒；③代谢性疾病：血色病、Wilson病、半乳糖血症等；④肝内、外长期胆汁淤积；⑤门静脉回流受阻；⑥免疫功能紊乱：狼疮性肝炎；毒素及治疗性药物：氨甲蝶呤、异烟肼等。第35页，共93页，星期日，2025年，2月5日乙醇的饮用量与肝硬化的发病率有密切关系，饮酒量越高的国家其肝硬化死亡率也越高。如饮酒量年人均量在10升以下的瑞典、英国、丹麦等国家，肝硬化死亡率在10/10万以下；而饮酒量年人均在27升左右的法国，肝硬化死亡率为30/10万以上。由于长期饮酒易形成乙醇性脂肪肝、乙醇性肝炎、乙醇性肝硬化。第36页，共93页，星期日，2025年，2月5日乙醇在胃和小肠上部迅速被吸收（胃30%、小肠上部70%），被吸收的乙醇90%～98%在肝内被代谢，其余的随尿和呼出气排出。乙醇的代谢途径有乙醇脱氢酶（alcoholdehydrogenase，ADH）乙醇氧化体系、微粒体