遗传学15第十四章基因表达的调控.pptVIP

乳糖操纵元01大肠杆菌的乳糖降解代谢途径：02Monod等发现，当大肠杆菌生长在含有乳糖的培养基上时，乳糖代谢酶浓度急剧增加；当培养基中没有乳糖时，乳糖代谢基因不表达，乳糖代谢酶合成停止。03为此，Jacob和Monod（1961）提出了乳糖操纵元模型，用来阐述乳糖代谢中基因表达的调控机制04乳糖操纵元模型图8－9乳糖操纵元模型及对有无乳糖的反应01两种组成型突变：I→I—，O→Oc,在有无诱导物时均可大量组成型表达02乳糖操纵元的负调控03乳糖操纵元的正调控除了阻遏蛋白能抑制lac操纵元转录外，其它因子也能有效地抑制lacmRNA转录，这个因子的活性与葡萄糖有关：→葡萄糖抑制腺苷酸环化酶的活性→腺苷酸环化酶催化ATP前体→cAmp→cAmp+代谢激活蛋白(CAP)→cAmp-CAP复合物，作为操纵元的正调控因子→当cAmp-CAP复合物的二聚体插入到lac启动子区域特异核苷酸序列时，使启动子DNA弯曲形成新的构型，RNA聚合酶与这种DNA新构型的结合更加牢固，因而转录效率更高。01→在有葡萄糖存在时，不能形成cAmp，也就没有操纵元的正调控因子cAmp-CAP复合物，因此基因不表达。02乳糖操纵元的正调控目前，通过遗传分析证明lac操纵元的存在；已经分离出阻遏蛋白，并成功地测定了阻遏蛋白的结晶结构，以及阻遏蛋白与诱导物及操纵子序列结合的结构图8－14乳糖操纵元的不同调控位点a：CAP结合位点；b：RNA聚合酶结合位点；R：形成抑制环的区域，下面的数字表示转录起始点上下游的碱基数色氨酸操纵元A大肠杆菌色氨酸操纵元是合成代谢途径中基因调控的典型例子：B色氨酸操纵元包括色氨酸合成中5种酶的结构基因。当培养基中有色氨酸时，色氨酸操纵元5种酶的转录同时受到抑制；在色氨酸供应不足时，发生转录。C色氨酸直接作为阻遏物而不是诱导物参与调控色氨酸mRNA的转录。因此trp操纵元是一个典型的可阻遏操纵元D图8－15色氨酸操纵元的组成阻遏物trpR由相距较远的阻遏物基因编码→无辅基阻遏物+trp→活性无辅基阻遏物—色氨酸复合物，与操纵子结合，阻止转录色氨酸不足时，无辅基阻遏物的三维空间结构发生改变，不能与操纵子结合，进行转录活性的阻遏物与操纵子结合并不足以抑制转录的起始。（弱化子）12弱化作用：在高浓度色氨酸存在时，转录的前导序列mRNA只含有140个核苷酸，其中有一段28bp的弱化子区域，它在转录后可迅速形成发夹环结构，RNA聚合酶转录时不能通过这种发夹环结构。所以弱化子是一种内部终止子。无色氨酸时，由于前导肽中色氨酸密码子的作用，使弱化子不能形成发夹结构而成为单链。RNA聚合酶则通过弱化子，继续向前转录结构基因。图8－16色氨酸前导序列经碱基配对形成几种二级结构阿拉伯糖操纵元阿拉伯糖操纵元也是解释代谢途径的调控系统，它具有一些与lac操纵元相似的特点，但与前述两种操纵元系统的显著区别是它的同一种调控蛋白--AraC调控蛋白既可起正调控,也可起负调控作用A、阿拉伯糖操纵元的组成。R：调控基因araC编码AraC蛋白；O：操纵子位点；I：诱导位点，具有CAP结合位点。有ara时，AraC与I位点结合，CAP-cAmp与CAP位点结合，诱导表达结构基因，为正调控。无ara时，没有CAP-cAmp复合体与CAP位点结合，AraC二聚体(D)与I及O2同时结合，形成抑制环，抑制转录，表现为负调控。翻译水平的调控反馈调控机制：大肠杆菌有7个操纵元与核糖体蛋白质合成有关。从这些操纵元转录的每一种mRNA，能够被同一操纵元编码的核糖体蛋白质识别与结合。如果其中有一种核糖体蛋白质过量积累，都将与其自身的mRNA结合，阻止进一步翻译。这种结合位点通常包括mRNA5’端非翻译区，也包括启动子区域的Shine-Dalgarno序列。反义RNA调控：反义RNA可与目的基因的5’UTR互补配对，配对的区域通常也包括启动子的Shine-Dalgarno序列，使mRNA不能与核糖体有效结合，从而阻止蛋白质的合成。01反义RNA基因已被导入真核细胞，控制真核生物基因表达。例如，将乙烯形成酶基因的反义RNA导入蕃茄，大大延长了蕃茄常温贮藏期。01二、真核生物的基因调控真核生物基因调控远比原核生物复杂：1）高等真核生物的基因组远比细菌的基因组大得多2）很多重复序列与调控作用有关3）染色质结构的变化可以调控基因表达4）存在同一染色体上不同基因间的调控，也存在不同染色体之间的基因调控调控发生在DNA水平，转录水平，转录后修饰，翻译水平和