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12-
生物技术在其他方面的应用
考点一蛋白质的提取和分别eq\a\vs4\al\co1(?5年未考?)
【任务驱动探究突破】
任务血红蛋白的提取和分别试验
(1)常用的分别方法:凝胶色谱法、电泳法等。
(2)基本原理
①凝胶色谱法:是依据相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法。
②电泳:利用待分别样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形态的不同,使带电分子产生不同的迁移速度。
(3)血红蛋白的分别过程
样品处理:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分别血红蛋白溶液
↓
粗分别:用透析法除去血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质
↓
纯化:用凝胶色谱法分别相对分子质量不同的蛋白质
↓
纯度鉴定:一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法来测定蛋白质的纯度
【考向分类对点落实】
考向血红蛋白提取和分别过程的考查
[经典高考]以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是()
A.洗涤红细胞时,运用生理盐水可防止红细胞裂开
B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少
C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分别过程的监测
D.在凝胶色谱法分别过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢
[归纳比较]
(1)比较琼脂糖凝胶电泳和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳
①从载体上看,利用琼脂糖凝胶作为载体的电流是琼脂糖凝胶电泳,利用SDS—聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电流是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。
②从依据上看,利用分子带电性质的差异和分子大小的电流是琼脂糖凝胶电泳,仅利用了分子大小的电流是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。
③从优点上看,琼脂糖凝胶电泳操作简洁,电泳速度快,样品不需处理,电泳图谱清楚,辨别率高,重复性好;SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳消退了静电荷对迁移率的影响,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
(2)凝胶色谱法分别蛋白质的原理
项目
相对分子质量大的蛋白质
相对分子质
量小的蛋白质
凝胶内部
不能进入
能进入
运动方式
垂直向下
垂直向下和无规则扩张运动
经过路程
较短
较长
洗脱次序
先流出
后流出
考点二植物有效成分的提取eq\a\vs4\al\co1(?国考5年1考?)
(全国卷:2017全国卷Ⅲ)
【任务驱动探究突破】
任务1植物芳香油的提取
(1)提取玫瑰精油试验
①方法:____________。
②试验流程
(2)提取橘皮精油的试验
①方法:一般用________法。
②试验流程
任务2胡萝卜素的提取
(1)胡萝卜素的性质:不溶于________,微溶于乙醇,易溶于________等有机溶剂。
(2)试验设计
①方法:萃取法,________最相宜作萃取剂。
②试验流程
(3)鉴定方法:________法。
【易错警示】
胡萝卜素粗品鉴定过程中的5个易错点
(1)层析时没有选择干净的滤纸,导致试验现象不明显。为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避开用手干脆接触滤纸,可以戴手套进行操作。
(2)点样时点样圆点太大(直径大于2mm),导致最终在滤纸上形成一条线,无法分辨被提取的色素;点样圆点的直径应为2mm。
(3)将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时不能将滤纸两边相互接触:以避开由于毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。
(4)层析液没及样品原点,可使色素溶解于层析液中,造成试验失败。层析液不行没及样品原点,以免色素溶解于层析液中,使鉴定失败。
(5)没设置标准样品作比照:层析液中是否提取到胡萝卜素,可通过与标准样品中的β-胡萝卜素作对比以予以确认。
任务3三种提取方法的比较
提取方法
水蒸气蒸馏法
压榨法
有机溶剂萃取法
试验原理
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来
通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油
使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂获得芳香油
方法步骤
①水蒸气蒸馏
②分别油层
③除水过滤
①石灰水浸泡、漂洗
②压榨、过滤、静置
③再次过滤
①粉碎、干燥
②萃取、过滤
③浓缩
适用范围
适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油
适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取
适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中
优点
简洁易行,便于分别
生产成本低,易保持原料原有的结构和功能
出油率高,易分别
局限性
水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题
分别较为困难,出油率相对较低
运用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量
任务4三种植物提取成分的比较
提取成分
比较项目
玫瑰精油
橘皮精油
胡萝卜素
性质
化学性质稳定、难溶于水、易溶于有机溶剂、能随水蒸气一同蒸馏
无色透亮、具有橘香味;重要成分为柠檬烯
橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂
提取方法
蒸馏
压榨
萃取
试验流程
鲜玫瑰花+清水
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