DB36T 678-2012 芦笋抗茎枯病人工接种评价技术规范.docxVIP

ICS65.020.01B01

备案号：34846-2012DB36江西省地方标准

DB36/T678—2012

芦笋抗茎枯病人工接种评价技术规范

Ruleofasparagusresistanceevaluationbyartificialinoculationtostemblight[Phomopsisasparagi(Sacc.)Bubak]

2012-06-14发布2012-09-01实施

江西省质量技术监督局发布

I

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前言

本标准的附录A为资料性附录。本标准由省农业科学院提出。

本标准起草单位：江西省农业科学院植物保护研究所。本标准主要起草人：李湘民、杨迎青、兰波。

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DB36/T678—2012

芦笋抗茎枯病人工接种评价技术规范

1范围

本标准规定了芦笋抗茎枯病[Phomopsisasparagi(Sacc.)Bubak]人工接种鉴定技术方法和芦笋品种抗性评价标准。

本标准适用于江西省芦笋品种对茎枯病人工接种抗性鉴定和评价。

2术语和定义

以下术语和定义适用于本标准2.1

接种体inoculum

指用于人工接种鉴定用的能够侵染芦笋并引起病害的芦笋茎枯病菌分生孢子悬浮液。2.2

人工接种artificialinoculation

在适宜发病条件下，通过人工操作将人工繁殖的接种体接于植物体适当部位。2.3

抗性评价evaluationofresistance

根据采用的技术标准判别植物寄主对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。

2.4

病情指数diseaseindex

全面评价发病率与严重度两者的综合指标。

3病原物接种体制备

3.1病原物分离

将采集的芦笋茎枯病标本在通风处阴干，采用组织分离法分离病部的茎枯病菌，用PDA培养基（去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂18g，pH6.5，水1000ml）进行分离、纯化培养，经致病性测定后，保存在培养基斜面试管中备用。

3.2接种体繁殖

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病原菌株在含PDA培养基试管里培养7d～10d，转接到PDA培养基上扩大培养5d～8d，然后在黑光灯下光照培养8d～12d。用无菌水洗下孢子，将接种孢子液浓度调至1×106孢子/ml以备用。以上菌株培养及产孢均在25℃下进行。

3.3接种体保存

病菌保存采用芦笋组织保存法。将直径为5mm的菌块（PDA培养基）1块，接入灭菌的芦笋组织中（将芦笋的茎杆基部切成5mm的方块），在25℃~28℃下培养7d～10d后，在30℃下风干d天，之后放置在-20℃或-70℃冰箱中保存（短期保存放置在4℃冰箱）。

4茎枯病抗性鉴定技术

4.1芦笋小苗的培育

芦笋种子催芽后播于5cm×5cm×5cm规格的塑料钵中，每个品种设3个重复，每个重复播10钵，每钵播3粒种子。出苗后按正常管理。

4.2接种和保湿培养

待小苗株高长至15cm～18cm，将配置好的孢子悬浮液（接种前在孢子悬浮液中加入0.1%的吐温-20）进行人工喷雾接种。每30钵喷孢子液50ml，接种后将小苗置于25℃、90%～100%相对湿度条件下的培养室中暗培养2d，之后在25℃~28℃、90%-100%相对湿度、12h/12h光暗交替条件下培养8d。

4.3病害调查

接种10d后进行茎枯病调查。病害分级及其症状描述见表1。

表1芦笋茎枯病严重度分级及其症状描述

级别

症状描述

0级

全株无病

1级

发病面积小于10%株冠面积

2级

发病面积占株冠面积的10.1%～30%

3级

发病面积/株冠面积的30.1%～50%

4级

发病面积大于50%株冠面积.

4.4病情指数计算

按下列公式计算病情指数：

病情指数=100×Σ（各级病株数×各级代表值）/(调查总株数×最高级代表值)

3

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5芦笋品种抗性评价标准

统计同一品种不同重复的鉴定结果，根据抗性评价标准确定抗感性。具体评价标准见表2。表2芦笋茎枯病抗性评价指标

抗感性

病情指数

感病Susceptible(S)

75%

中感Moderatelysusceptible(MS)

50%～75%

中抗Moderatelyresistant(MR)

25%～49.9%

抗病Resistant(R）

＜25%

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