酶学与酶工程 (2).ppt

二、可逆抑制作用动力学（一）竞争性抑制抑制剂（I）和底物（S）竞争酶的结合部位，从而影响了底物与酶的正常结合。第62页，共83页，星期日，2025年，2月5日第63页，共83页，星期日，2025年，2月5日竟争性抑制第64页，共83页，星期日，2025年，2月5日（二）非竞争性抑制底物与抑制剂同时和酶结合，两者没有竞争作用。第65页，共83页，星期日，2025年，2月5日非竞争性抑制第66页，共83页，星期日，2025年，2月5日c.邻近效应及定向效应所谓邻近效应就是底物的反应基团与酶的催化基团越靠近，其反应速度越快。第30页，共83页，星期日，2025年，2月5日d.变形或张力第31页，共83页，星期日，2025年，2月5日e.酶的活性中心为疏水区域酶的活性中心为酶分子的凹穴此处常为非极性或疏水性的氨基酸残基第32页，共83页，星期日，2025年，2月5日第三节酶作为催化剂的显著特点一．催化能力二．专一性三.调节性第33页，共83页，星期日，2025年，2月5日一．催化能力催化常数kcat（或转换数，TN）：每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。一般为103min-1，碳酸酐酶最高为3.6*107min-1有酶加入比无酶参加反应速度一般要高107-1013第34页，共83页，星期日，2025年，2月5日二．专一性1．绝对专一：只催化一种底物进行快速反应，甚至是立体专一性2相对专一性：基团专一和键专一第35页，共83页，星期日，2025年，2月5日三.调节性1.酶浓度的调节2激素调节3.共价修饰调节4.限制性蛋白水解作用与酶活力调控5.抑制剂的调节6.反馈调节7.金属离子和其他小分子化合物的调节第36页，共83页，星期日，2025年，2月5日第四节酶促反应动力学酶促反应动力学（kineticsofenzyme-catalyzedreactions）是研究酶促反应的速度以及影响此速度的各种因素的科学。酶促反应动力学的研究既有重要的理论意义，又具有一定的实践意义。第37页，共83页，星期日，2025年，2月5日一、底物浓度对酶反应速度的影响（一）中间络合物学说1903年Henri用蔗糖酶水解做实验，研究底物浓度与反应速率的关系。当酶浓度不变时，可以测出一系列不同底物浓度下的反应速度，以反应速度对底物浓度作图，可得一双曲线。从该曲线可以看出，当底物浓度较低时，反应速率对底物浓度的关系呈正比关系，表现为一级反应。随着底物浓度的增加，反应速率不再按正比升高，反应表现为混合级反应。当底物浓度达到相当高时，底物浓度对反应速率影响变小几乎无关，反应达最大速率，为零级反应。第38页，共83页，星期日，2025年，2月5日第39页，共83页，星期日，2025年，2月5日根据上述实验结果，Henri和Wurtz提出酶底物中间络合学说。（二）酶促反应的动力学方程式1.米氏公式的推导1913年Michaelis和Menten在前人工作的基础上，根据酶反应的中间复合物学说，推导出底物浓度与酶反应速率之间的定量关系，称之为米氏方程：Vmax[S]Ks+[S]V0=第40页，共83页，星期日，2025年，2月5日第41页，共83页，星期日，2025年，2月5日1925年Briggs和Haldane提出了稳态学说，对米氏方程作了修正，认为酶促反应分为两步进行：（1）酶与底物作用形成酶-底物复合物（ES）；（2）ES复合物分解形成产物，释放出游离酶。第42页，共83页，星期日，2025年，2月5日他们认为，许多酶催化反应的k2很高，k2不仅不特小于k－1，而且远比k－1大，即ES分解成E和P的速度比解离成E和S的速度快。该学说认为，在反应进行了一段很短的时间后，[ES]由0增加到一定数值，然后保持不变，即达到稳态水平，这时生成ES的速度与ES分解和解离的速度相等。第43页，共83页，星期日，2025年，2月5日第44页，共83页，星期日，2025年，2月5日Theterm(k2+k-1)/k1isdefinedastheMichaelis-Mentenconstant,Km.第45页，共83页，星期日，2025年，2月5日Animportantnumericalrelationshipemergesfr