特殊显微镜结构及操作技术.ppt

9.进行观察1）选择要使用的物镜2）移动系统聚光器上的“孔径光阑调节杆”，使孔径为物镜数值孔径的70－80%。（“把目镜筒转盘”设到＜B＞位置，转动勃氏镜调焦螺钉使其聚焦，当观察到物镜的出瞳和孔径光栏的象时，调节其大小。）3）调节“视场光阑调节杆”使视场光阑像与视场相大致相同。4）把透射照明器里的“ND减光片”进入或退出光路以调节视场亮度。第30页，共48页，星期日，2025年，2月5日第31页，共48页，星期日，2025年，2月5日10.更换样品利用显微镜主体上的“物镜再聚焦定位环”，照明器上的“倾斜装置”，“聚光器再聚焦指紧螺钉，可容易更换样品。第32页，共48页，星期日，2025年，2月5日11.显微镜操作结束后1)关闭电源开关(开关拨至O)2)灯室冷却后，把显微镜上的聚乙烯防尘罩盖好。第33页，共48页，星期日，2025年，2月5日相差（PH）显微术观察透明细胞或其他透明样品，需配相衬聚光器、相衬物镜、相衬环等附件。相衬板将衍射光推迟1/4波长，振幅相减，样品暗，背景亮，称正反差或暗反差，分正低（DL）、正低低（DLL）和中型暗相差（DM）。折光率较强的样品用后者。相衬板将直射光推迟1/4波长，振幅相加，样品亮，背景暗，称负反差或明反差，分负中（NM）和负高（NH）。折光率较小的样品用后者。第34页，共48页，星期日，2025年，2月5日第1页，共48页，星期日，2025年，2月5日【实验用品】1．试剂：10μg/mL罗丹明123的磷酸缓冲液（PBS）荧光染料。2．器材：倒置显微镜，相差显微镜附件（相差物镜、转盘聚光器、对中环形光阑和绿色滤色镜等），微分干涉显微镜附件（起偏镜、检偏镜和渥拉斯顿棱镜等），荧光显微镜附件（荧光发射器、激发滤片和阻断滤片等），载玻片，盖玻片，牙签，滤纸条，擦镜纸，镊子，滴管。第2页，共48页，星期日，2025年，2月5日【实验原理和方法】倒置显微镜是一种用于生物组织细胞离体培养观察的光学显微装置，能直接对培养皿、培养瓶的标本进行显微观察。由于它的物镜、物体和光源位置刚好与立式显微镜颠倒，被称为倒置显微镜。倒置显微镜的物镜在下，聚光器在上，被观察样品置于位于上方的聚光器之下，聚光器具有远大于物镜的工作距离。因此，适应于培养皿或培养瓶中样品的观察。高档倒置显微镜可根据不同观察要求，增加相差、微分干涉反差物镜或荧光发射装置，构建成相差显微镜、微分干涉显微镜或荧光显微镜。第3页，共48页，星期日，2025年，2月5日一、倒置显微镜的构造与使用（一）倒置显微镜的构造倒置显微镜由目镜、透射照明器、聚光器、载物台、物镜和显微镜机体等部件构成，以TE2000-U显微镜为例介绍。TE2000-U显微镜配有：T-DH100W透射照明器、LHS-H100P-112V100W灯室、12V100W卤素灯、TE2-PS100W电源、T-SR矩形载物台、T-TD双目镜筒D、CFI10X目镜、T-N6六孔物镜转换器，系统聚光器、物镜、电源线等。第4页，共48页，星期日，2025年，2月5日第5页，共48页，星期日，2025年，2月5日1.目镜筒及目镜A:屈光度调节环B:目镜C:目镜筒转盘O:开B:勃氏镜(带有聚焦螺钉)C:关(光闸)M:2.5倍放大第6页，共48页，星期日，2025年，2月5日2.显微镜机体第7页，共48页，星期日，2025年，2月5日3.透射照明器:透射照明器必须根据规定使用灯泡(12V100W或6V30W)。T-DH100W透射照明器需灯室。A：视场光阑调节杆B：滤色片滑片C：聚光器再聚焦制动器D：聚光器调焦旋钮E：聚光器固定螺钉F：聚光器安装定位孔G：聚光器安装定位槽H：聚光器转动指紧螺钉I：聚光器调中螺钉J：聚光器安装(可转动)支架K：LHS-H100P-112V100W灯室L：灯室固定螺钉M：灯室盖指紧螺钉N：聚光器支架(可移动)O：聚光器支架指紧螺钉P：灯室线Q：聚光器支架下降定位螺钉第8页，共48页，星期日，2025年，2月5日第9页，共48页，星期日，2025年，2月5日T-DS30W透射照明器A：防尘滑片(可移动)B：F堵口滑片(可移动)C：聚光器安装支架D：6V30W灯室E：滤色片滑片F：安装附加装置M4螺纹孔第10页，共48页，星期日，2025年，2月5日系统聚光器T-DH100W