原创力文档- 1、本文档共17页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
生物选修3学问点
（区分不同工程和不同操作程度）
专题1基因工程
概念：根据人们的愿望，进展严的设计，通过体外DNA
重组和转基因技术，给予生物新的遗传特性，创建
出更符合人们须耍的新的生物类型和生物产品。
根本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达
理论根底：DNA是生物遗传物质的发觉，DNA双螺旋构造，
遗传信息传递方式
一（）核心：构建重组DXA分子
-（）根本工具（技术根底）
Cf工具工具酶
1.限制性核酸内切酶
（1）来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的
2（）（不切割自身DNA的缘由：原核生物中无该限
制酶的识别序列或其已被修饰）
功能：识别和切割DNA分子内一小段特别的脱氧核昔酸序列（偶数碱基
对回文序列）
特异性表现：识别特定片段、切割该片段中的特
定位点、形成一种末端
Cf—GIGATCC——!GATC—
结果：DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端
①用切割（质粒）
②根据目的基因的位置或剪辑序列来确定限制酶的种类
③切割后的片段要画全
2.DNA连接酶
（1）功能：连接具有末端碱基互补的2个DNA片段，形成重组
DNA分子
CfDNA聚合酶：只能将单个脱氧核甘酸逐个添加到已有的脱
氧核甘酸链之后，
需模板DNA,连接磷酸二酯键
3.载体
（1）条件：①能在受体细胞中稳定保存并大量复制，根本不影
响受体细胞正常生命活动
②一至多个限制酣酶切位点（必需在所需标记基因
外），供外源DNA片段插入
③标记基因，便于挑选含有重组DNA分子的受体细
胞
一一往往须要根据需求改造自然载体
功能：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内
——载体选质粒的缘由：具有环状构造，可以携带
目的基因
②利用它在受体细胞内对目的基因进展大量复制和
转录/表达
⑵质最（常用的载体）
一种可以自主复制，在细菌或（酵母菌）中独立于染
色体之外存在的双链环状DNA分子
4（）其它载体：噬菌体、动植物病毒
二（）基因工程的根本操作程序
1.第一步：获得目的基因
2.目的基因：人们所须要的编码蛋白质的构造基因
3.方法
⑴序列已知
①化学合成法——较长DNA单链合成过程中简洁出现碱基
缺失
如反转录法e（.g获得mRNA逆转录成cDNA再用DNA聚合
酶生成双链）
②聚合酶链式反响P（CR）扩增PolymeraseChainReaction
（1）原料：水、缓冲液、4种游离脱氧核甘酸、TaqDNA聚
合酶、模板DNA…（…基因）、
对…基因特异的2段DNA引物（防止互相或自
身折叠）
（2）过程：第一步：加热至90〜95℃,DNA在高温下变性
解链
第二步：冷却到55〜60C,引物结合到互补D
NA链退（火）
文档评论（0）