猪CD82蛋白表达纯化及单克隆抗体制备.docxVIP

猪CD82蛋白表达纯化及单克隆抗体制备

目录

猪CD82蛋白表达纯化及单克隆抗体制备（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

一、内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.2研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

2.2实验设备与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.3实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.4表达系统构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.5猪CD82蛋白表达纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.6单克隆抗体制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

三、实验结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.1猪CD82蛋白表达结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.2猪CD82蛋白纯化结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.3单克隆抗体制备结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

四、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

4.1猪CD82蛋白表达纯化优缺点分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

4.2单克隆抗体特异性与敏感性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

4.3研究前景与应用展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

五、结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

5.1研究成果总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

5.2存在问题与改进措施．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

猪CD82蛋白表达纯化及单克隆抗体制备（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

1.1猪CD82蛋白的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.2CD82蛋白在生物学功能中的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.1.1猪组织样本．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.1.2实验试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2猪CD82蛋白表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2.1基因克隆与表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

2.2.2重组蛋白的表达与诱导．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.3猪CD82蛋白纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.3.1离心分离与沉淀．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.3.2蛋白纯化方法的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.3.3纯化效果鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.4单克隆抗体制备