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2025版新教材高考生物学第二轮复习
专题22基因工程
五年高考
考点1重组DNA技术的基本工具
1.2(023重庆,12,3分)某小组通过PCR假[设引物长度为8个碱基(于实际长度)]获得了含
有目的基因的DNA片段,并用限制酶进行酶切如(图),再用所得片段成功构建了基因表达
载体。下列叙述错误的是()
限制酶识别序列
SpeINheICfoI
,,,
5-^CTAGT-3S-cfcrAGC-S5-CCC4C-3
3-TGATC产,3YCATC尸‘3产冷
扩增
LJHS^ACCTACCAATCCTCATCAACTGCGCA-3
少色.3JTCCATCCTTACCACTACTTGACGCGT-5,
的DNA|——
片段①酶切
S^CTACCAATCCTC■■ATGAACTGCG-3
3-:T(TACCACTACTTCAC-5
A.其中一个引物序列为5-TGCGCAGT-3
B.步骤①所用的酶是SpeI和CfoI
C.用步骤①的酶对载体进行酶切,至少获得了2个片段
D.酶切片段和载体连接时,可使用E.coi连接酶或T4连接酶
2.2(022福建,21节选,4分)美西螺具有很强的再生能力。研究表明,美西螺的巨噬细胞在断
肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面
标志蛋白CD14的单克隆抗体,具体方法如下。回答下列问题:
一()基因工程抗原的制备
⑴根据美西螺CD14基因的核甘酸序列,合成引物,利用PCR扩增CD14片段。已知DNA
聚合酶催化引物的3-OH与加入的脱氧核甘酸的5-P形成磷酸二酯键,则新合成链的延伸
方向是
填(“5,-3”或-
⑵载体和CD14片段的酶切位点及相应的酶切序列如图所示。用XhoI和SaI分别酶切
CD14和载体后连接,CD14接入载体时会形成正向连接和反向连接的两种重组DNA。可
进一步用这两种限制酶对CD14的连接方向进行鉴定,理由
是。
⑶培养能表达CD14蛋白的大肠杆菌,分离纯化目的蛋白。
考点2基因工程的基本操作程序及应用
考向1DNA的粗提取、PCR、电泳鉴定
3.2(024黑、吉、辽,7,2分)关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验,下列叙述正确
的是()
A.琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小
B.凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置
C.在同一电场作用下,DNA片段越长,向负极迁移速率越快
D.琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫光灯下被检测出来
4.2(024山东,13,2分)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法正确的是
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