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基于COI序列的哈蟆油基原动物DNA条形码鉴定研究

哈蟆油具有较高的经济和社会价值，其混伪品较多，给市场造成了很大的

混乱。利用基于COI序列的DNA条形码技术对已鉴定的东北林蛙、中国林蛙、

桓仁林蛙和黑龙江林蛙进行PCR扩增和测序，建立4种林蛙COI基因数据库；

将所测的序列与GenBank上的序列进行比对，显示为上述4种林蛙；应用MEGA

（molecularevolutionarygeneticsanalysis）7.0软件计算K2P遗传距离并构建NJ

（neighbor-joining）系统聚类树，所测4种林蛙的序列和GenBank上下载的4种

林蛙的序列分别聚为1支，但与GenBank上下载的2个外群独立分开，东北林

蛙的COI基因可能存在地域性差异，但该技术并不能鉴别林蛙的雌雄。结果显

示DNA条形码技术能够准确鉴定哈蟆油的基原动物，说明DNA条形码COI为

哈蟆油基原动物的鉴定提供一个新的手段和方法。

标签：哈蟆油；东北林蛙；中国林蛙；DNA条形码；鉴定

IdentificationofRanaeOviductusoriginalanimalbasedonCOIsequences

WANGMeng-hu，KANGTing-guo*，XULiang*，YANGYan-yun，CAI

Zhen-jiao

（LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，China）

[Abstract]RanaeOviductushasahigheconomicandsocialvalue，butits

adulterantsaremorenumerous，whichcausesagreatconfusiontothemarket.Using

DNAbarcodetechnologybasedonCOIsequenceforPCRamplificationand

sequencingoftheidentifiedRanadybowskii，R.chensinensis，R.huanrensisandR.

amurensiss，theCOIgenedatabaseoffourspeciesofRanawasestablished，and

comparingthemeasuredsequencewiththesequenceofGenBank，fourkindsof

Ranawereidentified.TheMEGA（molecularevolutionarygeneticsanalysis）7.0

softwarewasusedtocalculatethegeneticdistanceofK2PandconstructtheNJ

（neighbor-joining）systemclustertree.ThesequenceofthefourspeciesofRana

measuredwereclusteredintoonegroupwiththesequenceofthefourkindsofRana

downloadedfromGenBank，butseparatedfromthetwooutergroupsdownloaded

fromGenBank.TheCOIgeneoftheR.dybowskiiwaslikelytohaveregional

differences，howeverthistechniquefailedtodistinguishmaleandfemaleRana.The

resultsshowedthatDNAbarcodetechnologycouldaccuratelyidentifythebaseof

originalanimalofR.oviductus.ItindicatesthatDNAbarcodeCOIpro