分析化学-第十章紫外-可见分光光度法.pptVIP

第六節紫外-可見吸收光譜在有機化合物結構分析中的應用簡介一、選擇題（一）單項選擇題1．紫外-可見光的波長範圍是：A.200~400nmB．400~760nmC．200~760nmD．360~800nm2．下列敘述錯誤的是：A．光的能量與其波長成反比B．有色溶液越濃，對光的吸收也越強烈C．物質對光的吸收有選擇性D．光的能量與其頻率成反比【目標檢測】第三節紫外-可見分光光度計三、紫外-可見分光光度計的類型2.紫外-可見分光光度計（1）單波長分光光度計單光束分光光度計雙光束分光光度計第三節紫外-可見分光光度計課堂活動1.試述紫外-可見分光光度計的主要部件及其作用？2.紫外-可見分光光度計有哪些類型？第三節紫外-可見分光光度計第三節紫外-可見分光光度計點滴積累紫外-可見分光光度計的基本結構相同，都由光源、單色器、吸收池、檢測器、訊號處理與顯示器等主要部件構成，但不同型號儀器的外形差別很大，品質和價格相差懸殊，操作方法迥異，使用之前應仔細閱讀儀器使用說明書。第四節分析條件的選擇一、儀器測量條件的選擇1.應選擇最大吸收波長作為入射光。2.應控制吸光度讀數範圍：吸光度在0.2~0.7之間；透光率在20%~65%之間。第四節分析條件的選擇二、顯色反應條件的選擇1.對顯色劑及顯色反應的要求2.控制合適的顯色反應條件三、參比溶液的選擇1.溶劑參比溶液2.試樣參比溶液3.試劑參比溶液4.平行操作參比溶液第四節分析條件的選擇課堂活動測定試樣時，吸光度的讀數應控制在0.2～0.7範圍內。若吸光度讀數不在此範圍，可採用哪些方法進行調整?第四節分析條件的選擇點滴積累1．選擇吸光性物質的最大吸收波長作為測定波長。2．使用紫外-可見分光光度計時，讀數範圍應控制在吸光度為0.2～0.7，透光率為65%～20%之間。3．待測物質在紫外-可見光區無吸收時，應加顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應必須完全。4．一般用溶劑作參比溶液。必要時採用試樣參比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。第五節定性定量方法一、定性分析方法定性的基本依據：比較光譜的一致性。未知物和標準品的吸收光譜曲線，對比二者是否一致。比較吸收光譜的特徵數據及比值的一致性。二、雜質檢查：將藥品光譜與藥品標準光譜相對照，利用雜質的特徵吸收，可以檢測出微量雜質及其含量。案例分析貝諾酯的定性鑒別中國藥典(2010年版)規定：貝諾酯加無水乙醇製成每1ml約含7.5μg的溶液，在240nm處有最大吸收，相應的百分吸光係數()應為730～760。維生素B12也有三個吸收峰，分別在278nm、361nm、550nm波長處，它們的吸光度比值應為：A361nm/A278nm在1.70～1.88之間，A361nm/A550nm在3.15～3.45之間。第五節定性定量方法案例分析葡萄糖注射液是臨床上常用的藥品之一。製備時需要高溫滅菌，葡萄糖會轉化為5-羥甲基糠醛而引入雜質。《中國藥典》（2010年版）規定葡萄糖注射液在284nm波長處的吸收度不得過0.32，以此控制其雜質5-羥甲基糠醛的量。在284nm波長處，葡萄糖無吸收，而雜質5-羥甲基糠醛在此波長處有最大吸收，可以通過控制供試品溶液在此波長處的吸收度來控制雜質的含量。第五節定性定量方法第五節定性定量方法三、定量分析方法定量分析的依據:A＝K·c·L（光的吸收定律）（一）單組分溶液的定量方法1.標準曲線法：是紫外-可見分光光度法中最經典的定量方法。第五節定性定量方法標準曲線法的方法和步驟如下:（1）配製一系列不同濃度的標準溶液，選擇合適的參比溶液，在相同條件下，以待測組分的最大吸收波長作為入射光，分別測定各標準溶液對應的吸光度。（2）以濃度c為橫坐標、吸光度A為縱坐標描繪標準曲線。第五節定性定量方法（3）按照相同的實驗條件和操作程式，用待測溶液配製未知試樣溶液並測定其吸光度A樣，在標準曲線上找到與之對應的未知試樣溶液的濃度c樣。如右圖。第五節定性定量方法2.標準對比法:在相同的條件下，配製濃度為cs的標準溶液和濃度為cx的試樣溶液，在最大吸收波長處，分別測定二者的吸光度值為As、Ax，依據朗伯-比爾定律得：As=csLAx=cxL則:第五節定性定量方法3.吸光係數法:吸光係數法直接利