分子生物学5课件.pptx

三、原核生物的基因轉錄及表達調控1.轉錄機器（裝置）（transcriptionapparatus）（1）RNA聚合酶（RNApolymerase）?（40kD）?（150kD），?‘（160kD）?（70kD）：specificityfactor核心酶（coreenzyme）：?，?‘，2?全酶（holoenzyme）：?，?‘，2?，??:specificityfactor

RNApolymerase（holoenzyme）

三、原核生物的基因轉錄及表達調控1.轉錄機器（裝置）（transcriptionapparatus）（2）啟動子（promoter）聚合酶的結合位點（bindingsite），一般位於轉錄起始位點上游RNA聚合酶與啟動子的結合（RNApolymerase/promoterbinding）ClosedpromotercomplexOpenpromotercomplex，轉錄才能開始

RNApolymerase/promoterbinding

（2）啟動子（promoter）Promoterstructure共同序列（consensussequence）Pribnowbox(-10box,DavidPribnow發現)-35box（-10box與-35box的最佳距離為17?1bp）下調突變（downmutation）上調突變（upmutation）

Promoterstructure下調突變（downmutation）上調突變（upmutation）

（2）啟動子（promoter）Promoterstructure強啟動子還有一些額外的元件，如E.coli編碼rRNA的rrngene中的UPelement（上游元件），可提高表達數十倍

Promoterstructure

（3）轉錄起始（transcriptioninitiation）Foursteps:FormationofaclosedpromotercomplexConversionoftheclosedpromotercomplextoanopenpromotercomplexPolymerizingthefirstfewnucleotides(upto10)whilethepolymeraseremainatthepromoterPromoterclearance

Stagesoftranscriptioninitiation

The?cycle

（4）延伸（elongation）核心酶起極其重要的作用，?亞基參與轉錄出的RNA的磷酸二酯鍵的形成

Elongation

（4）延伸（elongation）轉錄的拓撲學：兩種假說RNApolymerase及新合成的RNA都圍繞DNA旋轉RNApolymerase前後的DNA反向旋轉第二種假說有較多的依據：拓撲異構酶（topoisomerase）的存在

Elongation

（5）轉錄終止

（terminationoftranscription）聚合酶到達終止子（terminator）就會從範本上脫落終止子有兩種（終止方式也有兩種）intrinsic(?-independent)terminator(termination)?-dependentterminator(termination)

（5）轉錄終止?-independenttermination較為簡單，一段反向重複序列（invertedrepeat）與一富含T的區域（T-richregioninthenontemplatestrand）即為終止信號

?-independenttermination

（5）轉錄終止?-dependenttermination終止子只有一段反向重複序列（能形成hairpin結構）?是一種蛋白質（6聚體），可使RNA聚合酶的轉錄能力大大下降（具RNA-DNA解螺旋酶的作用，能解開轉錄複合體中RNA-DNA雙鏈）

?-dependenttermination

Atypicaltranscriptionunitsensestrand=nontemplatestrandantisensestrand=templatestrand（有義鏈）（反義鏈）