分子生物学9课件.pptx

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶I（polymeraseI）位於核仁RNA聚合酶II（polymeraseII）位於核質RNA聚合酶III（polymeraseIII）位於核質

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（1）三種RNA聚合酶對轉錄抑制劑的反應?-鵝膏蕈堿（?-amanitin）抑制polymeraseII（低濃度）抑制polymeraseII和polymeraseIII（高濃度）放線菌素D（actinomycinD）抑制polymeraseI

hnRNA:heterogeneousnuclearRNA(核不均一RNA)snRNA:smallnuclearRNA(核小分子RNA)

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（2）真核RNA聚合酶的亞基組成PolymeraseI、II、III都由多個亞基組成均有兩個較大的亞基（100kD）另有多個較小的亞基（大部分50kD）三種聚合酶都有一些共有亞基（commonsubunit）以釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的PolII為參照：Rpb5、Rpb6、Rpb8、Rpb10、Rpb12

LargesubunitsCommonsubunits

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構研究得比較清楚的一種有12個亞基（Saccharomycescerevisiae中）Rpb1、Rpb2、Rpb3、Rpb4、Rpb5、Rpb6、Rpb7、Rpb8、Rpb9、Rpb10、Rpb11、Rpb12Rpb:RNApolymeraseB(II)

Stoichiometry:化學計量（當量）

Principleofepitopetagging

抗原決定部位（表位）標籤法

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構核心亞基（coresubunits）Rpb1,Rpb2,Rpb3，對聚合酶的活性必不可少分別與原核RNA聚合酶的?’,?和?亞基同源，且功能也基本相同（Rpb3在聚合酶中也是有2個拷貝）

RegionsofhomologybetweenyeastRpb1andE.coli?’andbetweenRpb2and?

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構共有亞基（commonsubunits）與Rpb5,Rpb6,Rpb8,Rpb10,Rpb12相應的亞基，在3種RNA聚合酶中都存在在3種聚合酶中都存在，說明它們是起著十分重要的作用，但具體的功能不很清楚

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構非必需亞基（nonessentialsubunits）Rpb4,Rpb9，其基因的突變體在正常溫度下仍有活力，但在較高或較低溫度下則失去活力Rpb4和Rpb7（必需的亞基）與啟動子的識別有關（有點像?因數）Rpb9的功能不甚清楚

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構Rpb7和Rpb11另類亞基（不屬於上述3類）RNA聚合酶的活性所需（Rpb7與啟動子的識別有關）

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構核心亞基Rpb1的特殊之處不均一性（heterogeneity）在細胞內，有210kD和240kD兩種形式（IIa和IIo）；在體外，還有180kD這種形式（IIb）與對?-鵝膏蕈堿的敏感性有關

RelationshipsamongthedifferentformsofRpb1Carboxylterminaldomain,CTD（羧基末端域）：ArepeatingstringofTyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-SerGeneproduct

四、真核生物的基因轉錄及其調控1.真核生物的RNA聚合酶（3）RNA聚合酶II的結構在體內，含IIa的聚合酶II為RNApolymeraseIIA；含IIo的聚合酶II為RNApolymeraseIIORNApolymeraseIIA是與啟動子結合時的形式RNApolymeraseIIO是延伸時的形式

3-DstructureofyeastRNApolymeraseII