基因诊断课件.pptVIP

5.4.2感染性疾病-乙型肝炎的基因診斷擴增位置引物序列擴增片段大小(bp)P、X基因特異片段5’-ATACTGCGGAACTCCTAGC-3’2785’-CCGCGTAAAGAGAGGTGCG-3’Ｃ基因特異片段5’-ATACCACAGAGTCTAGACTCGTGGTGGACT-3’4775’-AAGCCCTACGAACCACTGAACAAATGGCAC-3’Ｃ基因特異片段5’-GCTTTGGGGCATGGACATTGACCCCTATAA-3’2585’-ATGGGATCCCTGGATGCTGGGTCTTCCAAA-3’乙型肝炎病毒基因檢測中部分常用的引物PCR技術用於乙型肝炎基因診斷bDNA技術流程HBV感染的早期診斷監測治療效果判斷病情，指導制訂合理的治療方案在乙型肝炎病毒耐藥檢測中的應用基因診斷在乙型肝炎中的臨床意義5.4.3腫瘤的基因診斷-肺癌細胞週期癌基因、抑癌基因基因組不穩定性雜合性丟失甲基化異常細胞週期的調控因素受細胞週期素及相對應的細胞週期素依賴激酶(cyclin-dependentkinase，CDK)嚴格調控細胞胞週期的每階段都有一組CDKs與cyclins交互作用來調控CDK的磷酸化及cyc-lin-CDK抑制劑(CKIs)的活化都會影響細胞週期癌基因(oncogene)1911年Rous發現的雞的腫瘤傳染因數是一種病毒，為反轉錄病毒癌化作用是因為病毒基因組內特殊致癌基因(v-onc)哺乳類的基因組上，也存在有同源的序列(e-onc)調控胚胎的發展、細胞的增殖、分化和凋亡調控失常，會使細胞發展為惡性表型，正常細胞中具有這樣潛能的基因稱為原(致)癌基因(proto-oncogene)原(致)癌基因調控生長分化、信號傳遞、轉錄因數、細胞周期生長因數病毒來源的sis基因與細胞來源的原癌基因-血小板衍生性生長因數次單位細胞表面生長因數受體表皮生長因數受體基因(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)集落刺激因數1受體(CSF1R)基因相當，CSF1R是一種促進骨髓中多種細胞分裂的生長因數細胞內信號傳遞系統(Intracellularsignaltransductionsystems)RAS家族是信號傳遞通路G-protein的成份，藉由跨膜蛋白與G-protein的結合將信號傳至核內蛋白質-酪胺酸激酶(proteintyrosinekinase)ABL是細胞內信號傳遞蛋白與信號傳遞至核內有關核內轉錄因數MYC是DNA結合蛋白，而JUN是轉錄因數細胞周期有關的蛋白調控細胞周期相關的激酶和激酶抑制物病毒性癌基因只有少數人類反轉錄病毒引起人類癌症HIV可以促進細胞增殖和增加體細胞突變的機會，或插入基因組促使鄰近基因活化引起免疫缺陷而間接促進腫瘤的產生病毒癌基因插入宿主癌化的原因有些的癌基因產物作用如同細胞癌基因產物有時插入的病毒癌基因是斷裂的，這些斷裂的序列可能是基因內的調控序列有些病毒癌基因的產物與細胞癌基因產物共存，可能調節癌蛋白活化腫瘤抑制基因(tumorsuppressorgene)在遺傳學上，癌基因對細胞的作用是顯性作用(dominanteffect)可抑制oncogene作用的基因，稱tumorsuppressorgene抑癌基因的蛋白產物能抑制細胞不正常生長及抑制細胞癌化遺傳學上一般屬於陰性(recessive)RB基因視網膜母細胞瘤(retinoblastoma，RB)，一種侵犯幼兒視網膜膜的腫瘤散發性非遺傳的類型最常見，會造成單側眼睛病變約1/3的RB病人產生多發性腫瘤，且常造成雙眼的病變，及在同胞兄弟姊妹中可發生同樣病變，家族傾向遺傳性

RB基因的功能蛋白產物pRb是細胞周期的刹車器pRb蛋白發生周期性的磷酸化反應pRb蛋白在GI期是細胞周期抑制信號的集合點，這個以pRb蛋白為中心的抑制傳導途徑，稱為RB傳導途徑靜止的細胞，pRb沒有磷酸化Gl期之末，在有絲分裂時間是磷酸化的非磷酸化的pRb在進入S期之前可與幾種蛋白質結合調控細胞週期p53基因抑制腫瘤生長的作用，基因定位在17p，p53是其分子量(53kD)在人類的大腸癌中有70%因失去p53功能50%的肺癌、40%的乳癌也因p53去活化而誘發人類癌症約有一半起因於p53突變缺陷或失去作用發生突變的蛋白質可能原因兩個alleles都發生缺失一個allele上發生錯義點突變，會抑制另一個正常野生型基因的功能正常細胞中，p53的量都很低