基因组的结构.pptVIP

Southernblot:1975年E.M.Southern建立酶解電泳拍照DNADNA片段電泳膠變性中和轉移到膜上漂洗封閉與probe雜交漂洗反射自顯影結果觀察轉移的方法：虹吸法、電轉移法及真空轉移法。其他分子雜交：Northernblot：1979年J.C.Alwine建立的DNA-RNA雜交Westernblot：抗原與抗體反應Southwesternblot：利用Southernblot與Westernblot兩種方法的特點而設計，用於檢測與蛋白質結合的特異DNA序列。二、多基因家族（multigenefamily），也稱基因家族（genefamily）：指來源相同、結構相似、功能相關的一組基因。家族成員可以排列在一起構成所謂的基因簇（genecluster)，也可以分散排列。基因家族可分為四種類型：簡單的多基因家族複雜的多基因家族不同場合表達的複雜的多基因家族散在分佈的多基因家族，如癌基因。三、基因複合體（genecomplex），也稱超基因（supergene）：是指緊密連鎖在一起的共同決定某一性狀的一組基因。亦有人認為超基因就是一個大的基因簇，其成員可達幾百個。人類的主要基因複合體有：免疫球蛋白基因複合體主要組織相容性複合體（majorhistocompatibilitycomplex,MHC）次要組織相容性複合體（minorhistocompatibilitycomplex）MHC是一組決定體細胞表面抗原的基因，這些抗原稱為同源白細胞抗原（homologousleucocyticantigenHLA）。MHC位於6p21~6pter，已知有35個基因座位，有幾百個基因。這些基因編碼兩類抗原：I類抗原：包括A、B、C、E、F、G、H、J等基因座位。這類抗原在Tc細胞特異地殺傷被感染細胞是起約束作用，即Tc細胞必須同時識別病毒抗原及靶細胞的I類抗原才能起殺傷作用。II類抗原：包括所有D系列的基因座位。這類抗原只存在於B細胞和巨噬細胞表面，在抗原提呈時起作用，即TH細胞必須同時識別外來抗原及II類抗原。兩個概念：單倍型（haplotype）：指若干個決定同一形狀的緊密連鎖的基因構成的基因型。連鎖不平衡（linkagedisequilibrium）：指由於基因的緊密連鎖而導致的一個基因的邊上總是出現某個基因。四、假基因（pseudogene）：在多基因家族中某些成員和編碼某一蛋白質的結構基因在結構上相似，但並不產生有功能的基因產物，這些基因稱為假基因。兩中類型的假基因：由正常基因的突變、缺失、重複等原因導致基因不能正常表達。缺少正常基因的部分元件、內含子等，更象正常基因經反轉錄後產生的，有人稱其為加工基因（processedgene）、反轉錄基因（retrogene）及反轉錄轉座子（retrotrsansposon）。五、轉座因數轉座因數最早是在真核生物中發現的。40年代，McClintock在研究玉米籽粒糊粉層色素合成時發現，與色素合成有關的C基因突變和回復突變的頻率很高，這些突變與染色體內一些位置不確定的因數有關。由此提出了轉座因數的概念。真核生物中研究得最清楚的是玉米的啟動——解離系統（Activator-Dissociator,Ac-Ds）。在Ac-Ds系統中，包括兩個位點，一是啟動位點（Ac），一是解離位點（Ds）。Ａｃ和Ｄｓ都可轉座，但Ｄｓ在轉座有賴於Ａｃ的存在，而Ａｃ則可自主轉座。事實上Ｄｓ是Ａｃ的缺失而形成的。Ｄｓ的轉座可帶來兩個方面的遺傳學效應，一是導致染色體斷裂，另一是插入某一基因而使之失活。ＭｃＣｌｉｎｔｏｃｋ就是在研究玉米籽粒糊粉層色素合成時發現Ｄｓ插入與合成色素有關的Ｃ基因的失活，從而發現Ａｃ－Ｄｓ系統Ac全長4500bp，末端有11bp的IR，有兩個基因，即轉座酶基因和阻遏物基因，因此可以自主轉座。Ds是Ac的缺失類型，缺失範圍可以從0.4kb~4kb，甚至只剩下IR也可以在轉座酶作用下發生轉座。除了玉米外，果蠅、酵母地轉座因數也研究的比較多。注意：真核生物轉座因數的轉座是切離轉座。六、原核基因組與真核基因組的比較１．真核生物基因組比較大。２．真核生物的