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1.2.1微生物的培养技术及应用
讨论:应该先对制作用具和原料进行灭菌处理,再接种纯的菌种,并控制发酵条件,避免杂菌进入。从社会中来
1.什么是微生物?P9相关信息2.前提/重要基础:3.基本要求:(1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件(2)确保其它微生物无法混入(3)并将需要的微生物分离出来培养基无菌技术纯化培养高压蒸汽灭菌锅一、微生物的培养技术
(一)培养基的配制1.培养基?用途?2.培养基的种类?3.培养基的必备营养成分?4.举例说明如何满足不同微生物的特殊需求。阅读教材P9-10完成以下问题:
需求→营养基质按物理性质分为:+凝固剂(如琼脂)1.概念:2.用途:3.类型:(一)培养基的配制液体培养基固体培养基
4.培养基的营养构成:组分含量提供的主要营养牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000ml某种常见的细菌培养基——1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成碳源P10相关信息氮源维生素磷酸盐无机盐水④厌氧微生物:①乳酸杆菌:②霉菌:③细菌:维生素酸性中性或弱碱性无氧思考:所有微生物是否都可以用培养基进行培养?病毒
获得纯净的微生物培养物的关键是:防止杂菌污染。(二)无菌技术操作的空间、操作者的衣着和手培养微生物的器皿、接种用具和培养基消毒灭菌①煮沸消毒法P10相关信息:生物消毒法②巴氏消毒法③化学药物消毒法④紫外线消毒①湿热灭菌法培养基等②干热灭菌法玻璃器皿金属器具③灼烧灭菌法接种工具充分燃烧层
1.培养物:3.纯培养:2.纯培养物:培养基内,特定种类微生物群体。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。获得纯培养物的过程。(三)微生物的纯培养
【探究实践】酵母菌的纯培养菌落:原理:微生物群分散或稀释单个细胞单个菌落繁殖念珠菌显色培养基大肠杆菌培养基酵母菌培养基金黄色葡萄球菌和枯草杆菌培养基单菌落:概念:一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。鉴别菌种:菌落的大小、形状、颜色、透明度、光泽度等是鉴定菌种的重要依据。方法:平板划线法和稀释涂布平板法稀释涂布平板法平板划线法P19
称切过滤加葡萄糖、琼脂定容实验方法步骤:配制培养基1.制备培养基
配制培养基灭菌分装,塞包扎、勒紧灭菌培养皿灭菌实验方法步骤:1.制备培养基
冷却到50℃左右酒精灯火焰附近配制培养基防止瓶口的微生物污染培养基灭菌倒平板不能完全打开,以免杂菌污染防止皿盖上冷凝水落入培养基造成污染。实验方法步骤:1.制备培养基1拔2过3倒4冷却、倒置
如果需要调节培养基的pH,应该在定容完成后,灭菌之前进行操作。1.培养基pH要适宜,调pH是在灭菌前还是灭菌后?思考2.怎么确定所倒平板未被杂菌污染?将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h~24,观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。3.丙→乙→甲→丁
连续划线、逐步稀释实验方法步骤:2.接种和分离酵母菌平板划线法1烧2冷却、拔3过2取5过、塞7划、重复6划、盖
第1次划线灼烧接种环灭菌第2次划线灼烧接种环灭菌第3次划线灼烧接种环灭菌灼烧接种环灭菌12345①取一次,连续划线多次;②上一末端始,首尾不相接;③每次划线前、划线操作结束后灼烧接种环;平板划线法注意事项酵母菌数随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单细胞繁殖而来的菌落。杀死原有微生物杀死残留菌种,使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端,从而使每次划线时菌种数目逐渐减少,直至得到单个细胞。杀死残留菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
接种后的平板一个未接种的平板倒置,(空白对照)实验方法步骤:3.培养酵母菌
酵母菌的纯培养2.接种和分离酵母菌1.制备培养基3.培养酵母菌①配制培养基(马铃薯、葡萄糖、琼脂、水)②灭菌③倒平板(在酒精灯火焰附近操作)培养基:湿热灭菌(高压蒸汽灭菌锅)培养皿:干热灭菌(干热灭菌锅)用接种环在固体培养基上用平板划线法接种平板倒置,放入28℃左右的恒温培养箱培养酵母菌纯培养小结
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