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斑片嶙瞄方法
松茸(Tricholomamatsutake)是一种深受人们喜爱的野生菌,又被称为“菌中之王”[1],是生长在松树、栋树根部
的真菌,主要分布在我国的四川、西藏、云南等高原地区[2]。它富有多种植物多糖、氨基酸、蛋白质、多肽类、酚类及
菇类等[3]活性成分,味道鲜美,富有很高的医疗和药用价值,使用历史悠久[4],而且是一种珍稀的药食两用真菌,被列
为二级濒危保护物种[5]。近年来,对其营养成分6-葡聚糖的研究逐渐引起了越来越多人的关注[6]op-葡聚糖也存在于一
些真菌如酵母的细胞壁上,具有较强的免疫功能[7-8],能够降血脂、抵抗辐射、缓解疲劳和改善肠道功能等[-10]。彳艮
多国家已将酵母伊葡聚糖作为日常的营养补充原料使用,且很多种类的食物中都允许添加,比如功能性饮料、乳制品、
烘焙食品和压片糖果等。2012年,国家原卫生部公布的第6号公告就已经将较大婴儿的配方奶粉列入酵母葡聚糖的
使用范围内。酸奶片是以牛奶粉、羊奶粉、驼奶粉等的发酵产物为主要原料,适量添加黏合剂、填充剂等辅料,经搅拌
混合、干法或湿法制粒,以及压片等工艺而制成的片状乳制品。其作为一种假日旅游食品,具有体积小、易携带、方便
食用等特点,深受不同群体的喜爱[11]o现阶段能够见到的奶片制品有益生菌奶片[12-13]、果蔬奶片[14-20]等,而将松
茸(经发酵)与奶粉相结合制成的富含葡聚糖酸奶片未见报道。本研究针对市场需求,开发一款将松茸、益生菌和乳
粉结合起来做成富含B-葡聚糖的酸奶片,填补该类型食品领域空白,满足人们对营养价值的更高需求。
1材料与方法
1.1材料与试剂
新鲜松茸,昆明市大观农贸市场;奶粉,超市普通奶粉;白砂糖,云南省红河糖业有限公司;赤薛糖醇,保龄宝
生物股份有限公司;酿酒酵母,北京北纳创联生物技术研究院,菌种编号:BNCC300560;酸奶发酵剂(嗜酸乳杆菌、
保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌、干酪乳杆菌、麦芽糊精),北京川秀科技有限公司;麦芽汁培养基,青岛
青药生物工程有限公司;葡聚糖标准品,北京万佳首化生物科技有限公司;“来伊份”益生菌酸奶片,昆明大观沃尔玛
超市;地衣聚糖酶(Units5000),上海安谱实验科技股份有限公司;葡萄糖昔酶(100U-g-1),成都欧恩瑞思化学
试剂有限公司;葡萄糖氧化酶(250U-mg-1),过氧化物酶(250U-mg-1),上海源叶生物科技有限公司;其他试剂
均为国产分析纯。
1.2仪器与设备
BL-200S电子天平,丹纳赫西特传感工业控制(天津)有限公司;PHS-3CpH计,雷磁分析仪器厂;TG电热
鼓风干燥箱,黑龙江迪尔制药机械有限公司;BI-250A低温生化箱,施都凯仪器设备(上海)有限公司;JC-FW-200粉
碎机,青岛聚创嘉恒分析仪器有限公司;HH-2数显恒温水浴锅,金坛区西城新瑞仪器厂;1850离心机,湖南湘仪实
验室仪器开发有限公司;DHS-16水分测定仪,上海力辰帮西仪器科技有限公司;SCIENTZ-100F/A冷冻干燥机,宁波
新芝冻干设备股份有限公司;ZP-170旋转式压片机,上海绿翊机械制造有限公司;UV-5200紫外可见分光光度计,上
海元析分析仪器有限公司;LC-20A高效液相色谱仪,日本岛津公司。
1.3实验方法
1.3.1松茸粉的制备
松茸子实体先用刀轻轻刮去表面泥土等异物,用水多次洗净,置于60°C干燥箱中鼓风干燥,粉碎至60目,加入
纯净水,料液比1:8,置于水浴锅中,于0°C加热30min灭菌,冷藏备用。
1.3.2菌悬液制备
将酿酒酵母冻干粉接入麦芽汁液体培养基进行活化,活化2代后,4000r-min-1离心20min,弃去上清液,用无
菌生理盐水清洗、离心2次,再用生理盐水分散沉淀得到活菌数为107CFU・mL-1的菌液。
1.3.3松茸发酵(松茸一次发酵)
在松茸溶液中接入10%的菌液,30°C静置24h。
1.3.4酸奶制备(松茸二次发酵)
松茸发酵液180目过滤,取少许滤液减压浓缩、干燥打粉,测定其中葡聚糖含量。加入滤液12%的奶粉,再
加入0.1%质量比的酸奶发酵粉,37°C保持8h,冷冻干燥即得到松茸酸奶粉。
1.3.5松茸酸奶片的制备
为避免湿法制粒过程中酒精对益生菌的渗透灭活影响,本实验采用干法制粒,然后压片。工艺流程:辅料混合一
干法制粒一整粒一压片一包装。称取松茸酸奶粉与辅料混合均匀
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