MM_FS_CNJ_0236出口油籽中丁酰肼残留量检验方法分光光度法.docVIP

MM_FS_CNJ_0236出口油籽丁酰肼残留量分光光度法

MM_FS_CNJ_0236

出口油籽中丁酰肼残留量检验方法分光光度法

本方法适用于出口花生仁中丁酰肼残留量检验。

在碱性条件下，试样中丁酰肼经用水蒸气蒸馏，水解成1，1二甲替肼而被蒸馏出，以酸性溶液接收。调整pH至5，用氨合五氰基亚铁酸三钠显色，于波长490nm处，测定吸光度，从而计算丁酰肼含量。

氢氧化钠溶液：10％(m/V)、50％(m/V)，分别称取10g、50g氢氧化钠，用少量的水溶解，稀释至100mL；

草酸溶液：10％，称取10g草酸，加水溶解至100mL；

氨合五氰基亚铁酸三钠[Fe(CN)5NH3·xH2O]溶液：0.1％(m/V)，称取0.1g氨合五氰基亚铁酸三钠，加水溶解并稀至100mL，转移至棕色瓶中，贮于冰箱中；

酚酞指示剂溶液：1％(m/V)；称取1g酚酞，加95％乙醇溶解并稀至100mL；

二甲替肼标准品：≥97％；

二甲替肼标准溶液：准确称取二甲替肼0.100g于小烧杯中，用水溶解并转移至100mL棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；此溶液浓度为1000μg/mL，作为标准贮备液；

移取1mL标准贮备液于另一个100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液浓度为10μg/mL，作为标准工作液；

蜂蜡：化学纯。

分光光度计：紫外/可见光；

粉碎机；

振荡器：往复式；

离心机：3000r/min；

量筒：50、100mL；

比色管：50mL；

烧杯：50、100mL；

锥形瓶：具塞，50、250mL；

移液管：1.0、5.0mL；

玻璃棒；

通用试纸：pH1～14；

水蒸气蒸馏装置：见图1；

A—圆底烧瓶：1000mL；B—圆底烧瓶：1000mL；C—蒸馏凝气阀；

D—冷凝管；E—锥形瓶：50mL

图1水蒸气蒸馏装置

以不超过200t为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

按式(1)计算抽样袋数：

a＝√—N…………………(1)

式中：a——抽样袋数；

N——全批袋数。

注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。

单管取样器：不锈钢管。全长55cm(包括手柄)，直径：4.5cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的一半；

取样铲；

分样板；

样品筒(袋)：可密封；

分样布或适用铺垫物。

从堆垛的各部位随机抽取规定的应抽样件数的10％(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上。双手紧握袋底两角，提起约成45°倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出。检查货物的外观、气味，有无发霉、变质等，并查看袋内和袋间品质是否均匀。确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品，立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取的样品量应基本一致。

按规定的应抽样件数的90％，在垛堆四周上、中、下各层以曲线形走向，随机抽取。将取样器管槽朝下，从每袋一角作斜对角方向插入袋内，然后将管槽旋转朝上，抽出取样器，立即将样品倒入盛样容器内。每袋抽取的样品量应与4.4.1基本一致。每批样品总量应不少于4kg。

集中袋内和倒包抽样所取全部样品，倒入分样布上，用分样板按四分法缩分出样品不少于2kg，置于盛样器内，加封后标明标记并及时送交实验室。

将样品按四分法缩分至1kg，全部磨碎，混匀，均分成2份试样，装入洁净的容器内，密封，标明标记。

将试样于－5℃以下避光保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生丁酰肼含量的变化。

称取粉碎混匀的试样约20g(精确到0.1g)于250mL具塞锥形瓶中，准确加水100mL，振荡30min，静置后离心15min(3000r/min)。移取60mL～80mL上清样液于蒸馏瓶(图中圆底烧瓶B)中，加入50％氢氧化钠50mL、2g蜂蜡。用少量水冲洗瓶壁，将蒸馏瓶连接在水蒸气蒸馏装置上。蒸馏约30min，蒸出液约35mL。蒸出液接受在先已加入5mL草酸溶液和2滴酚酞指示剂溶液的50mL锥形瓶中。

波长：490nm；

扫描速度：480nm/min；

仪器响应：2min；

狭缝：2nm；

光程：10mm；

光源：钨灯。

移取二甲替肼标准工作液(10μg/mL)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、5.0mL，于一组50mL比色管中，加入10％草酸溶液5mL、2滴酚酞指示剂溶液，再加入10％氢氧化钠约3.1mL，调至pH值为5。以下步骤按5.2.3进行，同时作试剂空白为参比液，以浓度对吸光度绘制标准曲线。

蒸出液(5.1)用10％氢氧化钠调整pH为5，加入0.1％氨合五氰基亚铁酸三钠溶液5mL，用水定容至50mL于比色管中，放置40min～50min，在波长490nm处测定吸光度。另一份不加试样，按上述测定步骤进行，所得溶液作为参比液。

按式(2)计