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第2节动物细胞工程第二章细胞工程动物体细胞核移植技术和克隆动物本节聚焦1.什么是动物细胞核移植技术?2.动物体细胞核移植的基本过程是什么?3.体细胞核移植技术的应用前景有哪些?4.怎样理性看待体细胞核移植技术存在的问题?
情景导入“(悟空)拔一把毫毛,丢在口中嚼碎,望空喷去,叫一声‘变!’,即变作三二百个小猴,周围攒簇(cù)。”这是《西游记》中的一段描述,展示了中华先贤的想象力。毫毛来自体细胞,我们能用体细胞“变”出一群猴吗?克隆猴的诞生与传统繁殖方式有什么不同?技术?动物体细胞核移植技术生殖方式:无性生殖
情景导入思考:1.克隆猴的过程中最大的困难是什么?最大的困难是如何才能激发动物细胞表达其全能性。2.植物细胞具有全能性,所以可以直接利用其体细胞培育出克隆植物。可以直接利用动物细胞培育出克隆动物吗?不能。因为动物细胞的全能性受到限制,不能经培养直接发育成完整个体,所以动物通过体细胞核移植技术得到克隆动物。
一、动物细胞核移植技术1.概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。2.原理:动物细胞核具有全能性。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。3.生殖方式:无性生殖→保持优良性状4.分类:胚胎细胞核移植体细胞核移植核供体不同--细胞分化程度低,全能性容易表现--细胞分化程度高,全能性难以表现动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
一、动物细胞核移植技术问题1:为什么非人灵长类动物体细胞核移植非常困难?原因一:供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低。原因二:非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。问题2:为何不称为“克隆技术”而是“核移植技术”?是一很广的概念,凡指新形成的事、物与亲本一致的现象均可称为“克隆”。在生物学上,克隆是无性繁殖,具体地说,是指一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的分子、细胞或个体。一般指DNA分子扩增,还包括单克隆抗体技术。由一个细胞分裂所形成的细胞群体。指基因型完全相同的个体或群体。分子水平:细胞水平:个体水平:
一、动物细胞核移植技术
二、体细胞核移植的过程1997年,美国的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。能否依据“多莉羊”的培育过程,进行优质奶牛的快速繁育?
一、动物细胞核移植技术合作探究:请同学们自主阅读教材P52,小组合作思考讨论完成问题。1.动物细胞核移植技术的概念?2.动物细胞核移植技术的原理?生殖方式?3.卵母细胞去核的方法?“去核”去的是什么?4.注入去核的卵母细胞的是整个供体细胞还是供体细胞的细胞核?为什么?5.诱导融合的方法?融合的结果?6.什么是重构胚?激活重构胚的方法?用这些方法处理重构胚的目的?
二、体细胞核移植的过程1.过程采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)2)为何选MⅡ期的卵母细胞?原因:①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质;②卵母细胞体积大,易操作;③卵母细胞营养物质丰富。去核:显微操作取体细胞去核的卵母细胞供体细胞1)什么是供体和受体?供体:提供细胞核的个体受体:MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)的卵母细胞选择10代以内
二、体细胞核移植的过程采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期高产奶牛(供体)去核:显微操作取体细胞去核的卵母细胞供体细胞3)卵母细胞为什么要“去核”?原因:保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。4)“核”的实质是什么?(P52页)5)“去核”的方法是什么?目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。1.过程
二、体细胞核移植的过程1.过程电融合法将整个供体细胞注入卵母细胞6)将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?优点:①对卵母细胞损伤较小;②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。实质是直接将供体细胞注入去核卵母细胞的透明带内7)如何使两个细胞发生融合?通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。
二、体细胞核移植的过程1.过程激活重构胚9)激活重构胚目的是?激活重构胚胎,使其完成细胞分裂和发育进程。重构胚:是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完成个体的能力。8)如何激活重构胚?用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚胎。
二、体细胞核移植的过程1.过程重构胚早期胚胎(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛克隆动物10)动物体细胞核移植技术证明了?(原理)该技术证明了:已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性
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