人胃癌类器官构建、质量控制与保藏团体标准—中国抗癌协会.docx

人胃癌类器官构建、质量控制与保藏团体标准—中国抗癌协会

摘要：近年来，类器官技术为肿瘤生物学研究、药物筛选、精准医疗和再生医学等领域提供了革命性的技术平台。与传统的二维细胞系和动物模型相比，源自患者的肿瘤类器官模型在结构和功能上更逼真地模拟了人体内的肿瘤微环境和肿瘤异质性，保留了原始肿瘤组织的病理学特征和遗传学信息，成为医学研究人员和临床工作者关注的热点。然而，行业内对于肿瘤类器官的构建及鉴定尚缺乏统一的操作标准，限制了类器官技术在基础研究和临床应用中的广泛推广和应用。因此，为推动类器官技术的规范化和标准化应用，中国抗癌协会联合国内相关领域的专家，制订针对胃癌原发灶和转移灶来源胃癌类器官的培养与质量控制的标准化和可复制的团体标准，旨在为临床工作者和医学研究者提供全面的指导，确保类器官研究的可靠性和可重复性，从而提高研究成果的准确性和应用价值。该团体标准的发布和实施，将为胃癌类器官技术的规范化和广泛应用提供强有力的支持，推动行业的健康、规范发展。随着未来基于胃癌类器官的研究不断深入，该团体标准也将根据最新的研究成果进行定期更新，以持续推动类器官技术在胃癌的基础研究和临床应用中的发展。

关键词：胃肿瘤；类器官；质量控制；团体标准

一、范围

本文件提供了人胃癌类器官构建、质量控制与保藏的基本原则、操作流程方法以及检测指标与检测方法的指导与建议［1-5］。本文件适用于人胃癌类器官的培养、传代、冻存、复苏、质量控制与保藏过程［6］。

二、规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T37864—2019生物样本库质量和能力通用要求GB/T38736—2020人类生物样本保藏伦理要求GB/T42060—2022医学实验室样品采集、运送、接收和处理指南WS233—2017病原微生物实验室生物安全通用准则T/NAHIEM6—2018医学研究伦理委员会通用要求

三、术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。（一）胃癌类器官（gastrictumororganoid）由被病理诊断为胃癌的患者自体肿瘤原发灶或转移灶样本中提取的肿瘤细胞，通过3D培养技术而形成的类器官，其能够在体外扩增并重现原始肿瘤的病理形态和遗传特征。（二）胃癌类器官培养基（culturemediumforgastrictumororganoid）可以在体外模拟胃癌细胞生长及扩增所需微环境、诱导胃癌细胞长期体外扩增培养、维持原始肿瘤细胞特性、保证体外胃癌组织类器官长期存活的培养介质。（三）3D培养基质（culturematrix）组成成分包括但不限于层黏连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白和硫酸肝素糖蛋白，添加物包括但不限于生长因子、小分子化合物和/或微量元素、激素。在室温条件下，各种组成成分与添加物能够聚合形成具有生物学活性的三维基质，后者能够模拟体内细胞基底膜结构和功能，能够为胃癌细胞的生长提供支架。（四）类器官传代（organoidpassage）采用物理吹打联合化学酶消化的方法将培养至一定大小、状态良好的类器官解离为小细胞团或单细胞悬液，再将其重新接种于与原培养条件相同的培养体系内，继续进行类器官培养。新一代类器官与原来的类器官具有相同的形态功能特征。（五）类器官冻存（organoidcryopreservation）在类器官传代2~3d即类器官增殖能力最强时，采用物理吹打的方法收集类器官，加入冻存保护剂，程序降温后置于-196℃液氮中低温保存，使其暂时脱离生长状态而保留其细胞特性。冻存后的类器官在需要时应能复苏用于试验。（六）类器官复苏（organoidthawing）将处于深低温冻存的类器官取出并恢复其继续生长状态的过程。（七）伦理审查委员会（ethicsreviewcommittee）负责对科学研究中涉及的伦理道德问题进行评估和审查的专门组织。（八）知情同意（informedconsent）是指有自主判断能力的供者或其法定监护人，在获得并充分了解样本和数据捐赠相关信息之后，认识到供者所受到的风险最小，且没有受到任何利诱或恐吓等不当行为影响的前提下，自愿自主地捐赠个人生物样本及其关联数据时与采集者/收集者共同签署的文件，包括但不限于合适条件下潜在研究应用、研究成果潜在的商业应用及其他问题所适用的内容。注：知情同意书由采集者/收集者和被收集者共同签署，一式两份。正本由采集者/收集者保存，被收集者保存副本。伦理要求与隐私保护见GB/T38736―2020第3.7条。（九）肿瘤细胞存活率（tumorcellviabilityrate）能够增殖、保持代谢活性以及形成肿瘤类器官的细胞比例。（