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离子交换法回收提取谷氨酸
一、实验目的
通过实验掌握新树脂的预处理方法及动态离子交换的基本操作;了解谷氨酸提取的原理
和方法。
二、实验原理
树脂的选择,选择离子交换树脂的主要依据是被分离物的性质和分离目的。包括被分
离物和主要杂质的解离特性、分子量、浓度、稳定性、所处介质的性质以及分离的具体条件
和要求。然后从性质各异的多种树脂中选择出最适宜的品种进行分离操作。
其中最重要的一条是根据分离要求和分离环境保证分离目的物与主要杂质对树脂的吸
附力有足够的差异。当目的物具有较强的碱性和酸性时,宜选用弱酸性弱碱性的树脂。这样
有利于提高选择性,并便于洗脱。如目的物是弱酸性或弱碱性的小分子物质时,往往选用强
碱、强酸树脂。如氨基酸的分离多用强酸树脂,以保证有足够的结合力,便于分步洗脱。对
于大多数蛋白质,酶和其它生物大分子的分离多采用弱碱或弱酸性树脂,以减少生物大分子
的变性,有利于洗脱,并提高选择性。
就树脂而言,要求有适宜的孔径,孔径太小交换速度慢,有效交换量下降(尤对生物大
分子),若孔径太大也会导致选择性下降。此外树脂的化学稳定性及机械性能也需考虑.在
既定的操作条件下有足够的化学耐受性和良好的物理性能以利操作。一般树脂都有较高的化
学稳定性,能经受酸、碱和有机溶剂的处理。但含苯酚的磺酸型树脂及胺型阴离子树脂不宜
与强碱长时间接触,尤其是在加热的情况下。对树脂的特殊结合力也要给予足够的注意,如
树脂对某些金属离子的结合以及辅助力的作用。
+
氨基酸为两性电解质,等电点较低的谷氨酸在pH小于pI3.2时,主要以GA型式存在,
故可用强酸性阳离子交换树脂提取。当发酵液流过交换柱时,发酵液中各成分依亲和力的不
同进行交换。吸附GA的树脂再用洗脱液(5%NaOH)洗脱,收集富含GA的流分(高流液)。
从而实现与杂质的分离及GA的富集,高流液调等电点pH3.2,GA结晶析出。用过的树脂
用稀酸再生以用于下轮交换(图1)。主要化学反应有:
交换:RSOH+NH+=RSONH+
3434
++
RSOH+GA=RSOGA+H
33
-+++
洗脱:RSOGA+NaOH=RSONa+GA+HO
332
-+++
RSOGA+NHOH=RSOHN+GA+HO
34342
+
再生:RSONa+HCl=RSOH+NaCl
33
1
料液交换(上柱)流出液(废液)
(GA及杂质)
再生后树脂(RSOH)交换后树脂(RSOGA)
33
洗脱剂洗脱并再生洗脱液(GA)
再生剂再生废液
图1GA离子交换操作循环
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