枸杞蜂蜜对葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎的作用及分子机制研究.pdfVIP

本研究承蒙

山东省蜂产业技术体系产品加工与质

量控制岗位

（）

SDAIT-24-05

山东省自然科学基金面上项目

（）

ZR2021MC110

泰山学者青年专家项目

（）

NO.tsqn202211172

资助

聊城大学硕士学位论文

摘要

IBDIBD

炎症性肠病（）是一个全球性的卫生保健问题，发病率持续上升。具有

反复发作、终身受累的特点，严重威胁人们的消化系统健康。目前大多数治疗IBD

的药物都有副作用，这会降低患者的依从性并导致病情恶化。因此从天然产物中寻求

抗炎性药物是治疗IBD的一种重要的途径。蜂蜜是一种集营养价值和保健功效于一

身的药食同源的天然蜂产品。枸杞蜂蜜是我国西北地区特有的单花蜂蜜，其蜜源植物

为枸杞。但枸杞蜂蜜对IBD是否有效，目前尚不清楚。基于此，本研究以枸杞蜂蜜

为研究对象，首先对其品质进行评价，接着通过体外细胞实验和体内动物实验分别研

究其对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的肠炎的功效及作用机制。

主要研究结果如下：

(1)首先对枸杞蜂蜜理化性质进行测定，结果显示均符合国家标准和欧盟法典委

员会的标准；总酚、总黄酮含量和抗氧化活性的测定，表明枸杞蜂蜜抗氧化能力较强；

孢粉学鉴定表明枸杞蜂蜜中的花粉颗粒符合其蜜源植物枸杞花的孢粉学特征；代谢组

学分析发现枸杞蜂蜜富含多酚类化合物，来源可靠，品质良好。

(2)在体外DSS诱导的结直肠腺癌细胞（Caco-2）损伤模型中，枸杞蜂蜜提取物

能够提高细胞存活率，降低活性氧（ROS）活性及保护线粒体膜电位。进一步研究发

现，枸杞蜂蜜提取物可以抑制DSS诱导的Caco-2细胞中TLR4/NF-κB信号通路的激

活；并且WesternBlot、免疫荧光和跨上皮细胞膜电阻实验表明，枸杞蜂蜜提取物可

以增加细胞间紧密连接蛋白的表达和降低肠上皮通透性，以此来减轻DSS诱导的

Caco-2细胞损伤。

(3)在体内DSS诱导的结肠炎小鼠模型中，与体外的研究一致，加入枸杞蜂蜜处

理的小鼠体重下降减少、疾病活动指数评分下降、结肠长度增加；并且枸杞蜂蜜可以

Il-1βIl-6Tnf-αMcp-1Cat

显著下调促炎细胞因子、、和的表达，上调抗氧化基因、

Nrf2、Sod1和Sod2的表达，以减轻结肠炎小鼠的炎症反应与氧化应激；此外，枸杞

蜂蜜显著上调Zo-1和Occludin的基因表达水平保护肠上皮屏障。进一步通过对粪便

菌群16SrRNA测序和非靶向血清代谢组学的分析显示，枸杞蜂蜜可以影响肠道菌群

的总体丰富度，增加norank_f__Muribaculaceae,Lactobacillus,Romboutsia,

Candidatus_Saccharimonas,Parabacteroides和Faecalibaculum的相对丰度，降低

i

聊城大学硕士学位论文

Escherichia-Shigella的丰度，以保持肠道菌群结构的相对稳定；同时，枸杞蜂蜜可能

通过调节甘油磷脂代谢中磷脂酰胆碱、胆碱和溶血磷脂酰胆碱的水平，来缓解DSS

诱导