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蓝莓组培技术

蓝莓组培技术蓝莓组培一、实验室设计1.准备室:(1)进行药品的

保存、配置、消毒、分装等。(2)器具的洗涤、干燥、消毒。(3)生理生

化指标的测定等。2.接种室：进行材料的接种，内置超净工作台或接

种箱。外设缓冲间-放置拖鞋、工作服、工作帽等。3.培养室：植物材

料的无菌培养，室内主要有培养架和控制温度及光照的设备。4.细胞

学观察实验室：进行培养材料的组织学、细胞学、观察照相等。二、

常用设备和器材1.高压蒸气灭菌锅：用于培养基、蒸馏水和接种器械

的灭菌消毒。2.超菌工作台：用于培养物的无菌操作。（由鼓风机、滤

板、操作台、紫外灯和照明灯组成）3.接种工具：包括双筒实体显微

镜、镊子、剪刀、解剖刀、洒精灯等。4.培养设备：包括空调机、定

时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床或旋转床、日光

灯、光照培养箱等。5.化学实验及分析设备：包括天平、酸度计、蒸

馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等高

压灭菌锅手提式灭菌锅培养箱超净工作台烘干箱电子天秤三、玻璃器

皿的选择和清洗1.玻璃器皿的选择*试管-适合于用少量培养基及试

验各种不同配方时选用。*三角锥瓶-适用于各种培养（如固体培养、

液体培养、大规模培养或一般培养）。*L形管和T形管-为专用的旋转

式液体培养试管。*培养皿-适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药

培养和无菌发芽。*角形培养瓶和圆形培养瓶-适用于液体培养用，如

单细胞和原生质体的浅层培养。*果酱瓶-常用作试管苗大量繁殖用的

培养瓶。2.玻璃器皿的清洗（1）清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗

洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液。（2）清洗时先将器皿中的残渣除去，

用清水洗净，再用热的肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净后用蒸馏

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水冲洗一次，干后备用。（3）洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水

膜均匀，不挂水珠。四、影响植物组培的因素1.植物因素：(1)基因型，

(2)植物年龄，(3)组织和器官的年龄，(4)植物的生理状态，(5)取材年

份及生长条件，(6)取材部位及大小。2.培养基因素：无机盐、有机化

合物、植物激素、天然提取物、琼脂、PH值、渗透压、活性炭。植物

组织培养的成功与否，除了培养材料本身的因素外，很大程度上取决

于对培养基的选择。培养基的种类、成份等直接影响培养材料的生长

发育。故应根据培养材料的种类和部位，选取适宜的培养基。3.外植

体的选择和灭菌:不同品种、不同器官之间的分化能力有差别，且组织

培养是建立在无菌操作基础之上的专门技术，因此在进行植物组织培

养时，必须选择合适的外植体进行灭菌操作，以确保组织培养工作的

顺利进行。4.环境因素：(1)光照：包括光强、光质、光周期，(2)温度，

(3)湿度，(4)气体。五、培养基的主要成分及制作程序（一）、培养基

的主要成分：1.无机盐：(1)大量元素：C..C。(2)微量元素.B.Na。(3)水：

培养基95%是水，应使用蒸馏水、双蒸水或使用去离子水,水应放在塑

料容器中。2.有机化合物：(1)糖(碳源和能源)，(2)维生素类：有维生

素b1(盐酸硫胺素)、维生素b6(盐酸砒哆醇)、生物素、烟酸、叶酸等，

(3)氨基酸类(有机氮源)。3.植物激素（生长调节物质）：（1）生长素：

主要包括IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2,4-D（2，4-二氯苯氧乙

酸）、IBA（吲哚丁酸）；它们的主要作用是诱导愈伤组织的形成、胚状

体的产生以及试管苗的生根，更重要的是配合一定比例的细胞分裂素

诱导腋芽及不定芽的产生；作用的强弱顺序为：2，4-DNAAIBAIAA。

（2）细胞分裂素：天然：6-BA（6－苄基酰嘌呤）、KT（激动素，糠基

酰嘌呤）；人工：ZT（玉米素）、2-iP（2-异戊烯酰嘌呤）；它们的主要

作用是促进细胞的分裂和器官的分化、延缓组织的衰老、增强蛋白质

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的合成、抑制顶端优势、促进侧芽的生长及显著改变其他的激素作用；

作用的强弱顺序为：TDZ,4PUZT2-iP6-BAK。（3）赤霉素：GA3。（4）

乙烯及乙烯抑制剂。4.天然提取物（如椰乳、酵母提取物、番茄汁、

香蕉泥等），其作用是提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质

和生长激素等。5.琼脂（是从海藻中提取的一种高分子碳水化合物），

其主要作用是使培养基在常温下凝固，同时不参与代谢。6.活性炭：

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