艾滋病实验室质量管理与控制.pptVIP

（1）外部对照质控血清的组成理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳性对照、临界值对照和阴性对照。在每次实验时应设置一个单一浓度水平的质控品即弱阳性对照。这个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒Cut-off值的2－3倍为宜。第29页，共70页，星期日，2025年，2月5日（2）外部对照质控血清的来源和选择1）通过向有关机构购买获得2）通过实验室制备获得(比较经济的方法)①混合试剂盒内部对照血清，等量分装。②混合HIV抗体阳性或阴性人血清，3000转/分钟离心15分钟，用0.2?m生物滤膜过滤除菌后再进行56℃30分钟加热灭活处理。弱阳性对照可以通过使用HIV抗体阴性的正常人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并经标定后得到。弱阳性对照的OD值以2－3倍于Cut-off为宜。第30页，共70页，星期日，2025年，2月5日ELISA反应强度曲线OD样品强度第31页，共70页，星期日，2025年，2月5日（3）外部对照质控血清的保存1）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验室一年使用2）外部对照血清应该均一、无菌3）外部对照血清标定后应该等量分装，每个分装的量应足够一周使用4）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签5）外部对照血清应该存放在－70℃，如无条件则存放在非自动除霜的－20℃冰箱6）外部对照血清一旦融解以后应该存放在2－8℃，一周后必须弃去，不能重新冻存。第32页，共70页，星期日，2025年，2月5日（4）外部对照质控血清的使用

每一次实验必须使用外部对照质控血清，建立质控图，以便监控实验操作的一致性和结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差(批间差异)。第33页，共70页，星期日，2025年，2月5日(5)、质控规则及使用实验室在报告实验结果之前必须评价质控数据，可通过图形记录的检查或由计算机审核结果来决定。目前许多质控规则已被采用，常用的是12S和13S规则。第34页，共70页，星期日，2025年，2月5日质控规则12S13S随机误差22S系统误差31S系统误差41S系统误差R4S随机误差7x系统误差7T向上或向下的趋势8x系统误差9x系统误差10x系统误差第35页，共70页，星期日，2025年，2月5日控制规则的使用(用功效函数图评价)1.单个规则:例如12S或1３S２.联合控制规则：例如12S与1３S联合；12S与２２S与R4S联合；３.Westgard多规则质控：1３S与２２S与R4S与４１S与１０X４．平均数和极差控制方法５．1３S与累积和联合规则第36页，共70页，星期日，2025年，2月5日质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，即具有高的检出分析误差的能力，同时应具有较低的假失控概率。考察试验系统的可靠性应采用多标准质控方案，多规则质控方法能提高误差检出，并具有低的假失控概率。第37页，共70页，星期日，2025年，2月5日

统计质量控制方法Levey-Jennings控制图方法Westgard多规则控制方法累计和方法平均数和极差方法趋势分析方法利用病人数据分析方法“即刻法”质控方法（Grubbs）第38页，共70页，星期日，2025年，2月5日质控图XX+SX-SX-2SX+2S第39页，共70页，星期日，2025年，2月5日（二）质控图的建立及应用

1.建立质控图参数2.绘制质控图3.质控图的判断和分析4.考察试验系统的可靠性可采用多标准质控方案的要点5.绘制和分析质控图的要点6.变异系数（CV）分析7.灰区

第40页，共70页，星期日，2025年，2月5日1、建立质控图参数对HIV抗体检测(ELISA)外部对照质控血清的评价采用多次测定的S/OD值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对照S/OD值的95％可信限为x?2s。各个外部对照的标定即确定外部对照的均值和可信限，可用几个统计学参数如均值(x)、标准差(s)以及变异系数(cv)来确定可信限。①算术平均值(x):代表一组S/CO值的平均值。为了统计学上有显著性意义，应该采用至少20次(天)所测得的外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值（如果仅做少量批次的检测，也至少做5个批次的检测，每个批次中不少于4个质控物测定结果，以建立一个临时性的平均值和标准差，当达到20批次数据后，替代临时性的平均值和标准差）。②标准差(s)是描述样本与均数之间离散程度的一个指标，是与对照值的均值有关的预期范围。