4食品安全食品中叶酸的测定.pptx

2015-09-21发布

食品安全国家标准食品中叶酸的测定

2016-03-21实施

中华人民共和国国家标准

犌B5009．211—2014

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

犌B5009．211—2014

前言

本标准代替GB／T5009．211—2008《食品中叶酸的测定》、GB5413．16—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中叶酸(叶酸盐活性)的测定》。

本标准与GB／T5009．211—2008相比，主要变化如下：

—标准名称修改为“食品安全国家标准食品中叶酸的测定”；

—修改了菌种名称，由干酪乳杆菌改为鼠李糖乳杆菌；

—删除了培养基和用于叶酸盐降解的鸡胰腺供货信息；

—删除了附录B中购解酪蛋白液的制备方法；

—增加了检出限和定量限。

Ⅰ

1范围

本标准规定了食品中叶酸的测定方法。

本标准适用于食品中叶酸的测定。

2原理

叶酸是鼠李糖乳杆菌LaCtobaCiluSCaSeispp．ThamnoSuS(ATCC7469)生长所必需的营养素，在一定控制条件下，将鼠李糖乳杆菌液接种至含有试样液的培养液中，培养一段时间后测定透光率(或吸光度值)，根据叶酸含量与透光率(或吸光度值)的标准曲线计算出试样中叶酸的含量。

3试剂和材料

注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB／T6682规定的二级水。

3．1试剂

3．1．1盐酸(HCl)。

3．1．2氢氧化钠(NaOH)。

3．1．3氯化钠(NaCl)。

3．1．4十二水合磷酸钠(Na3PO4·12H2O)。

3．1．5七水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)。

3．1．6磷酸氢二钾(K2HPO4)。

3．1．7三水合磷酸二氢钾(KH2PO4·3H2O)。

3．1．8七水合硫酸钱(MgSO4·7H2O)。

3．1．9七水合硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)。

3．1．10一水合硫酸锰(MnSO4·H2O)。

3．1．11三水合乙酸钠(CH3CooNa·3H2O)。

3．1．12葡萄糖(C6H12O6)。

3．1．13抗坏血酸(C6H8O6)。

3．1．14甲笨(C7H8)。

3．1．15无水乙醇(C2H6O)。

3．1．16鸡胰腺干粉：含γ-谷股酷基水解购。

3．1．17木瓜蛋白购：购活力≥5U／mg。

3．1．18α-淀粉购：购活力≥1．5U／mg。

3．1．19蛋白陈：含氮量≥10％。

3．1．20酵母提取物(干粉)：含氮量≥10％。

食品安全国家标准

食品中叶酸的测定

犌B5009．211—2014

3．1．21琼脂。

2

犌B5009．211—2014

3．2试剂配制

3．2．1磷酸缓冲液(0．05mol／L，pH6．8)：分别称取4．35g十二水合磷酸钠和10．39g七水合磷酸氢二钠，用水溶解并稀释至1L，混匀。加入2mL甲笨，室温保存。临用前按大约5mg／mL的比例加入抗坏血酸作为叶酸保护剂，加入量以pH达到6．8为宜。

3．2．2乙醇溶液(20％，体积分数)：量取200mL无水乙醇与800mL水混匀。

3．2．3氢氧化钠乙醇溶液(0．01mol／L)：称取0．4g氢氧化钠，用乙醇溶液溶解并稀释至1L，混匀。3．2．4氢氧化钠溶液(1mol／L)：称取40g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L，混匀。

3．2．5盐酸溶液(1mol／L)：量取83．3mL盐酸，用水稀释至1L，混匀。

3．2．6盐酸浸泡液：量取100mL盐酸与50倍水混合。

3．2．7鸡胰腺溶液：称取100mg鸡胰腺干粉，加入20mL磷酸缓冲液，摇匀。现用现配。

3．2．8蛋白购-淀粉购液：分别称取200mg